| D92P点突变对扩展青霉碱性脂肪酶最适作用温度的改善 |
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| 引用本文： | 陈木妹,林琳. D92P点突变对扩展青霉碱性脂肪酶最适作用温度的改善[J]. 生物技术通讯, 2005, 16(1): 31-33 |
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| 作者姓名： | 陈木妹 林琳 |
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| 作者单位： | 福建师范大学,生物工程学院,福建,福州,350007 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30270033)，福建省自然科学基金重点项目(B0120001) |
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| 摘 要： | 利用重叠延伸PCR法对扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)基因进行体外定点突变，并构建了含突变基因的重组质粒pPIC3．5K—lip-D92P。将该质粒在毕赤酵母GS115菌株中表达。与野生型表达产物PEL-GS相比较，突变体表达产物PELD92P—GS最适作用温度为45℃，比野生型提高了5℃；其热稳定性与野生型相当；突变体在40℃下的表达量为109U／mL，约为野生型的29％。结果分析表明，Pro替代Asp^92后，可能是由于Pro一级结构的特点，使酶结构更加稳定，在高温下更适于与底物结合。
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| 关 键 词： | 扩展青霉 碱性脂肪酶 最适作用温度 定点突变 重叠延伸PCR法 蛋白质工程 |
| 文章编号： | 1009-0002(2005)01-0031-03 |
| 修稿时间： | 2004-09-29 |
Improvement of the Optimum Temperature of Penicillium expansum Lipase by Mutation of D92P |
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| CHEN Mu-mei,LIN LinBioengineering College of Fujian Normol University,Fuzhou ,China. Improvement of the Optimum Temperature of Penicillium expansum Lipase by Mutation of D92P[J]. Letters in Biotechnology, 2005, 16(1): 31-33 |
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| Authors: | CHEN Mu-mei LIN LinBioengineering College of Fujian Normol University Fuzhou China |
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| Affiliation: | CHEN Mu-mei,LIN LinBioengineering College of Fujian Normol University,Fuzhou 350007,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Penicillium expansum lipase site-directed mutagenesis optimum temperature |
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