| 人载脂蛋白E7转基因小鼠肾脏cDNA削减文库与cDNA文库 |
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| 引用本文： | 田增遂,琦祖和,薛越强. 人载脂蛋白E7转基因小鼠肾脏cDNA削减文库与cDNA文库[J]. 中国实验动物学报, 2002, 10(2): 86-90 |
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| 作者姓名： | 田增遂 琦祖和 薛越强 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院基础医学研究所生物化学与分子生物学室,医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005 |
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| 摘 要： | 目的 以人apoE7基因制备的高脂血症转基因小鼠模型已建成 ,要用于探查这一突变基因致病的分子机制 ,首先揭示人apoE7在小鼠体内诱发了那些基因的表达异常 ,是重要的环节之一。cDNA削减文库是寻找异常高表达的已知和未知基因有效的手段 ,而cDNA文库更是获取全长基因所必须。方法 自正常小鼠与转基因小鼠肾脏同时提取总RNA ,再分离mRNA ,逆转录制备cDNA后 ,用两次分子杂交削除转基因鼠cDNA中与正常小鼠相同的部分 ,再用PCR与择需PCR法扩增转基因鼠特异的基因 ,克隆入pGEM T载体后 ,制备削减文库。未经削减的转基因小鼠cDNA克隆入λgt11载体 ,制备基因表达文库。结果和结论 自高脂血症转基因小鼠肾脏构建的削减文库得到约 4 0 0个削减克隆 ,测定了部分克隆的序列 ,并进行同源性比较。λgt11 cDNA文库滴度 1 7× 10 7pfu ml,随机测定的克隆其插入片段长约 5 0 0bp以上。
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| 关 键 词： | 杂交 聚合酶链反应 文库 |
| 文章编号： | 1005-4847(2002)02-0086-05 |
| 修稿时间： | 2001-09-04 |
The cDNA Subtractive Library and cDNA Library of the Kidney of Human Apolipoprotein E7 Transgenic Mice |
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| TIAN Zengsui,QI Zuhe,XUE Yuqiang. The cDNA Subtractive Library and cDNA Library of the Kidney of Human Apolipoprotein E7 Transgenic Mice[J]. Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica, 2002, 10(2): 86-90 |
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| Authors: | TIAN Zengsui QI Zuhe XUE Yuqiang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hybridization Polymerage chain reaction library |
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