改进型外部引导序列抑制人巨细胞病毒UL49 基因的表达

外部引导序列（EGS）技术（The EGS-based technology）是一种新型的基因沉默技术，能诱导内源性的核酶 P（RNase P）对靶mRNA进行有效切割. 以人类巨细胞病毒（HCMV）UL49基因mRNA片段为靶序列，基于前人实验基础上设计出更为精简与高效的改进型EGS (miniEGS)，DNA片段长度仅为12 bp. 构建稳定表达HCMV UL49的细胞系，通过应用荧光定量PCR及Western 印迹分别鉴定miniEGS对内源性UL49的抑制效率.结果显示，miniEGS能在HeLa细胞中能达到很高的转染效率（97.9%），并且在转染稳定表达UL49的HeLa细胞系后，发现UL49基因的mRNA与蛋白表达水平都出现明显下降（50%）.研究表明, 改进型的EGS序列不仅能有效抑制目的基因的表达，同时因其序列设计的精简性与高效性，可更好地应用到以后的抗病毒研究中.