| 假定蛋白CT440在沙眼衣原体感染细胞中的定位研究 |
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| 引用本文： | 李忠玉,黄秋林,粟盛梅,周洲,陈超群,钟光明,吴移谋.假定蛋白CT440在沙眼衣原体感染细胞中的定位研究[J].中国科学:生命科学,2012,42(1):64-70. |
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| 作者姓名： | 李忠玉 黄秋林 粟盛梅 周洲 陈超群 钟光明 吴移谋 |
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| 作者单位： | 南华大学微生物学与免疫学教研室, 衡阳 421001;
南华大学附属第一医院, 衡阳 421001;
University of Texas Health Science Center at San Antonio, TX 78229, USA |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(批准号: 30970165, 81102230)、湖南省自然科学基金(批准号: 09JJ3059)和湖南省高校科技创新团队(批准号: 湘教通[2010] 212 号)项目资助 |
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| 摘 要： | 包涵体膜蛋白在沙眼衣原体致病过程中发挥重要的作用.为确定假定蛋白CT440在沙眼衣原体感染细胞中的定位及特征,本研究采用PCR方法从D型沙眼衣原体的基因组中扩增Ct440基因,克隆入pGEX-6p原核表达载体构建pGEX-6p/Ct440原核表达重组体,重组体转化到XL1-blue大肠杆菌,IPTG诱导表达融合蛋白GST-CT440.纯化后的CT440融合蛋白免疫小鼠制备抗体,间接免疫荧光(IFA)和Western blot测定抗体的特异性.特异性抗体用于分析CT440蛋白在衣原体感染细胞内的定位、表达时相特征及其对衣原体感染的影响.结果表明,CT440蛋白定位于沙眼衣原体包涵体膜上,为沙眼衣原体包涵体膜蛋白;该蛋白在衣原体感染12h后开始表达,直至持续到整个感染周期;转基因在胞浆表达的CT440融合蛋白不影响其后的衣原体感染.本实验为深入研究衣原体与宿主细胞间的相互作用,阐明衣原体致病机制提供了重要的实验依据.
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| 关 键 词： | 沙眼衣原体 CT440 包涵体膜蛋白 |
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