| 共表达PDI1、MDH1和HAC1基因对重组毕赤酵母分泌表达葡糖氧化酶的影响 |
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| 引用本文： | 张文玉,魏东升,钱江潮. 共表达PDI1、MDH1和HAC1基因对重组毕赤酵母分泌表达葡糖氧化酶的影响[J]. 中国生物工程杂志, 2019, 39(10): 24-33. DOI: 10.13523/j.cb.20191004 |
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| 作者姓名： | 张文玉 魏东升 钱江潮 |
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| 作者单位： | 华东理工大学生物反应器国家重点实验室 上海 200237 |
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| 基金项目： | * 中央高校基本科研业务费专项(22221818014) |
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| 摘 要： | 葡糖氧化酶(GOD)可催化葡萄糖生成过氧化氢和葡萄糖酸,在工业上被广泛应用。在构建的一株整合多拷贝GOD基因且含有HAC1表达单元的重组毕赤酵母G/GMH1的基础上,共表达分子伴侣二硫键异构酶基因PDI1和苹果酸脱氢酶基因MDH1,考察PDI1、MDH1基因与HAC1共表达后对GOD分泌表达的影响。这些基因共表达后对重组菌的生长无明显影响。PDI1和MDH1分别与HAC1共表达后,重组菌G/GMH1-PDI1和G/GMH1-MDH1的胞外GOD产量达到11 731. 9U/g DCW和1 1047. 6U/g DCW,比出发菌提高了17. 3%和10. 4%,前者达到了目前所报道摇瓶培养的最高单位菌体酶活水平。而三基因共表达重组菌G/GMH1-PDI1-MDH1的GOD产量略有下降。在所构建的菌株中,GOD基因的转录水平仅在G/GMH1-PDI1-MDH1中略有提高,与酶产量的提高无直接关系。与出发菌相比,共表达基因的转录水平在新构建的菌中有不同程度的升高,说明这些基因被成功转录。PDI1和MDH1基因转录在G/GMH1-PDI1和G/GMH1-MDH1中分别被上调,可能与GOD产量提高有关。虽然GOD、HAC1、PDI1和MDH1基因在G/GMH1-PDI1-MDH1中均被上调,但并未促进酶产量的提高。
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| 关 键 词： | 重组毕赤酵母 葡糖氧化酶 HAC1基因 PDI1基因 MDH1基因 |
| 收稿时间： | 2019-03-28 |
Effects of Co-expression of PDI1, MDH1 and HAC1 Gene on Secretory Expression of Recombinant Glucose Oxidase in Pichia pastoris |
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| ZHANG Wen-yu,WEI Dong-sheng,QIAN Jiang-chao. Effects of Co-expression of PDI1, MDH1 and HAC1 Gene on Secretory Expression of Recombinant Glucose Oxidase in Pichia pastoris[J]. China Biotechnology, 2019, 39(10): 24-33. DOI: 10.13523/j.cb.20191004 |
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| Authors: | ZHANG Wen-yu WEI Dong-sheng QIAN Jiang-chao |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Recombinant Pichia pastoris Glucose oxidase HAC1 gene PDI1 gene MDH1 gene |
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