首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
   检索      

共表达PDI1、MDH1和HAC1基因对重组毕赤酵母分泌表达葡糖氧化酶的影响
引用本文:张文玉,魏东升,钱江潮.共表达PDI1、MDH1和HAC1基因对重组毕赤酵母分泌表达葡糖氧化酶的影响[J].中国生物工程杂志,2019,39(10):24-33.
作者姓名:张文玉  魏东升  钱江潮
作者单位:华东理工大学生物反应器国家重点实验室 上海 200237
基金项目:* 中央高校基本科研业务费专项(22221818014)
摘    要:葡糖氧化酶(GOD)可催化葡萄糖生成过氧化氢和葡萄糖酸,在工业上被广泛应用。在构建的一株整合多拷贝GOD基因且含有HAC1表达单元的重组毕赤酵母G/GMH1的基础上,共表达分子伴侣二硫键异构酶基因PDI1和苹果酸脱氢酶基因MDH1,考察PDI1、MDH1基因与HAC1共表达后对GOD分泌表达的影响。这些基因共表达后对重组菌的生长无明显影响。PDI1和MDH1分别与HAC1共表达后,重组菌G/GMH1-PDI1和G/GMH1-MDH1的胞外GOD产量达到11 731. 9U/g DCW和1 1047. 6U/g DCW,比出发菌提高了17. 3%和10. 4%,前者达到了目前所报道摇瓶培养的最高单位菌体酶活水平。而三基因共表达重组菌G/GMH1-PDI1-MDH1的GOD产量略有下降。在所构建的菌株中,GOD基因的转录水平仅在G/GMH1-PDI1-MDH1中略有提高,与酶产量的提高无直接关系。与出发菌相比,共表达基因的转录水平在新构建的菌中有不同程度的升高,说明这些基因被成功转录。PDI1和MDH1基因转录在G/GMH1-PDI1和G/GMH1-MDH1中分别被上调,可能与GOD产量提高有关。虽然GOD、HAC1、PDI1和MDH1基因在G/GMH1-PDI1-MDH1中均被上调,但并未促进酶产量的提高。

关 键 词:重组毕赤酵母  葡糖氧化酶  HAC1基因  PDI1基因  MDH1基因  
收稿时间:2019-03-28

Effects of Co-expression of PDI1, MDH1 and HAC1 Gene on Secretory Expression of Recombinant Glucose Oxidase in Pichia pastoris
ZHANG Wen-yu,WEI Dong-sheng,QIAN Jiang-chao.Effects of Co-expression of PDI1, MDH1 and HAC1 Gene on Secretory Expression of Recombinant Glucose Oxidase in Pichia pastoris[J].China Biotechnology,2019,39(10):24-33.
Authors:ZHANG Wen-yu  WEI Dong-sheng  QIAN Jiang-chao
Abstract:
Keywords:Recombinant Pichia pastoris  Glucose oxidase  HAC1 gene  PDI1 gene  MDH1 gene  
本文献已被 CNKI 等数据库收录!
点击此处可从《中国生物工程杂志》浏览原始摘要信息
点击此处可从《中国生物工程杂志》下载免费的PDF全文
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号