| 副干酪乳杆菌β-葡糖苷酶的表达、纯化及酶学性质研究 * |
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| 引用本文： | 谢玉锋,韩雪梅,路福平.副干酪乳杆菌β-葡糖苷酶的表达、纯化及酶学性质研究 *[J].中国生物工程杂志,2019,39(5):72-79. |
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| 作者姓名： | 谢玉锋 韩雪梅 路福平 |
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| 作者单位： | 1 省部共建食品营养与安全国家重点实验室 天津科技大学生物工程学院 天津 3004572 哈尔滨学院食品工程学院 哈尔滨 150086 |
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| 基金项目： | * 宁夏回族自治区重点研发计划(2018BBF02008);国家级大学生创新创业训练计划资助项目(201810234004) |
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| 摘 要： | 为了实现糖苷类物质的高效转化,将来源于副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)TK1501 β-葡糖苷酶基因连接于表达载体pET28a(+)上,在E. coli BL21中表达,重组酶经镍离子亲和层析分离得到纯酶,其分子质量和比酶活分别为86.63kDa和675.56U/mg。最适作用温度和pH分别为30℃和6.5。 Mg 2+和Ca 2+对β-葡糖苷酶酶活抑制作用最小,Cu 2+几乎使其丧失催化活性。其底物特异性较宽泛,对大豆异黄酮、栀子苷、水杨苷、七叶苷、虎杖苷、熊果苷均有降解作用。以β-pNPG为底物时,该酶的Km和Vmax分别为1.44mmol/L和58.32mmol/(L·s),催化系数kcat为3 982/s。结果与分析表明,来源于副干酪乳杆菌TK1501 β-葡糖苷酶对水解大豆异黄酮和合成糖苷将会发挥重要作用。
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| 关 键 词： | 副干酪乳杆菌 β-葡糖苷酶 纯化 酶学性质 |
| 收稿时间： | 2018-10-15 |
Expression,Purification and Enzymatic Properties of β-glucosidase from Lactobacillus paracasei |
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| Yu-feng XIE,Xue-mei HAN,Fu-ping LU.Expression,Purification and Enzymatic Properties of β-glucosidase from Lactobacillus paracasei[J].China Biotechnology,2019,39(5):72-79. |
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| Authors: | Yu-feng XIE Xue-mei HAN Fu-ping LU |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Lactobacillus paracasei β-glucosidase Purification Enzymatic properties |
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