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两种UDP-葡萄糖脱氢酶对透明质酸生物转化的影响
引用本文:郭东会,韩剑,刘伟丰,傅震洲,朱启忠,陶勇. 两种UDP-葡萄糖脱氢酶对透明质酸生物转化的影响[J]. 生物工程学报, 2014, 30(11): 1691-1700
作者姓名:郭东会  韩剑  刘伟丰  傅震洲  朱启忠  陶勇
作者单位:1 山东大学海洋学院,山东 威海 264209;2 中国科学院微生物研究所,北京 100101;2 中国科学院微生物研究所,北京 100101;2 中国科学院微生物研究所,北京 100101;1 山东大学海洋学院,山东 威海 264209;2 中国科学院微生物研究所,北京 100101
基金项目:中国科学院微生物研究所工业微生物组学改造及应用创新培育基金“第二批”资助。
摘    要:分别从大肠杆菌和化脓链球菌中扩增出编码UDP-葡萄糖脱氢酶基因ecohas B和spyhas B,并将其插入T7表达载体p RX2构建重组质粒p RXEB和p RXSB。在大肠杆菌BL21(DE3)中重组表达,并对经镍柱纯化后的UDP-葡萄糖脱氢酶的酶学性质进行分析。酶学性质研究表明:spy Has B的最适反应温度是30℃,最适p H 10,最适条件下的比活力是12.2 U/mg;eco Has B的最适反应温度是30℃,最适p H 9,最适条件下的比活力是5.55 U/mg。从多杀巴氏杆菌扩增出的透明质酸合成酶基因pmuhas A分别与ecohas B和spyhas B构建共表达载体p BPAEB和p BPASB。将其转化到大肠杆菌BW25113中,经生物转化生产透明质酸(HA),并对转化条件进行了优化。结果表明:重组菌株进行透明质酸转化时,UDP-葡萄糖脱氢酶酶活力越高,稳定性越好,HA产量越高;转化条件优化后,p BPAEB/BW25113和p BPASB/BW25113在摇瓶中的产量分别是1.52和1.70 g/L,比之前报道的提高了2-3倍。

关 键 词:UDP-葡萄糖脱氢酶  酶学性质  透明质酸  生物转化
收稿时间:2014-03-10

Effects of two UDP-glucose dehydrogenases on hyaluronic acid biotransformation
Donghui Guo,Jian Han,Weifeng Liu,Zhenzhou Fu,Qizhong Zhu and Yong Tao. Effects of two UDP-glucose dehydrogenases on hyaluronic acid biotransformation[J]. Chinese journal of biotechnology, 2014, 30(11): 1691-1700
Authors:Donghui Guo  Jian Han  Weifeng Liu  Zhenzhou Fu  Qizhong Zhu  Yong Tao
Affiliation:1 Marine College, Shandong University, Weihai 264209, Shandong, China;2 Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;2 Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;2 Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;1 Marine College, Shandong University, Weihai 264209, Shandong, China;2 Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China
Abstract:
Keywords:UDP-glucose dehydrogenase   enzyme characterization   hyaluronic acid   biotransformation
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