| 限制性内切酶EcoR的高效表达与纯化 |
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| 引用本文： | 刘金毅,赵晓娟,蔡有余,沈洁,孟雁.限制性内切酶EcoR的高效表达与纯化[J].中国生物化学与分子生物学报,2000,16(3):417-420. |
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| 作者姓名： | 刘金毅 赵晓娟 蔡有余 沈洁 孟雁 |
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| 作者单位： | 刘金毅（中国协和医科大学中国医学科学院实验动物研究所遗传室,北京 100021）
赵晓娟（中国协和医科大学中国医学科学院实验动物研究所遗传室,北京 100021）
蔡有余（中国协和医科大学中国医学科学院实验动物研究所遗传室,北京 100021）
沈洁（中国协和医科大学中国医学科学院实验动物研究所遗传室,北京 100021）
孟雁（中国协和医科大学中国医学科学院实验动物研究所遗传室,北京 100021） |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(39380009)资助 |
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| 摘 要： | EcoR Ⅱ was the first restriction endonuclease ever found requiring the cooperative interaction with the least two DNA sites for digestion activity.To study the specific activity, Eco R Ⅱ was purified from hyperexpression engineering bacteria in which the specific expression products increased to about 20% of total cellular protein.By using chromatography on DEAE cellulose column,phosphocellulose column and FPLC of Resource Q,the enzyme was purified from soluble protein fraction.The inclusion bodies were solved and renatured,and the enzyme was purified from this part of protein with higher specific activity by using FPLC of Resource Q.Detection showed that the enzyme was purified to homogeneity and was free of detectable contamination by other DNase(exo and endo).
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| 收稿时间： | 2000-06-20 |
| 修稿时间： | 1999年6月24日 |
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