人酸性成纤维细胞生长因子基因在大肠杆菌中的克隆和表达 |
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引用本文: | 汪浩勇,王会倍,黄培堂,薛沿宁,李丰生,芮贤良,赵强,周廷冲.人酸性成纤维细胞生长因子基因在大肠杆菌中的克隆和表达[J].中国生物化学与分子生物学报,1991,7(6):713-718. |
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作者姓名: | 汪浩勇 王会倍 黄培堂 薛沿宁 李丰生 芮贤良 赵强 周廷冲 |
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作者单位: | 军事医学科学院基础医学研究所,军事医学科学院基础医学研究所,军事医学科学院基础医学研究所,军事医学科学院基础医学研究所,军事医学科学院生物工程研究所,军事医学科学院生物工程研究所,军事医学科学院基础医学研究所,军事医学科学院基础医学研究所 北京 100850,北京 100850,北京 100850,北京 100850,北京 100850,北京 100850 |
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基金项目: | 国家自然科学基金389720200号 |
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摘 要: | 用Ncol Ⅰ和EcoRI双酶酶切,获得人酸性成纤维细胞生长因子haFGF基因,将该基因片断连接进入pBV220的EcoRI位点。连接物转化入大肠杆菌RR1,用菌落原位杂交的方法筛选出杂交阳性菌株,用酶切和Southern Blot的方法确定haFGF的插入与否以及插入方向的正反,结果我们得到了haFGF正向插入在pBV220 PLPR启动子下游的重组质粒pBV-αFGF。42℃热诱导使重组子表达,其菌体的裂解液对3T3细胞的DNA合成有较强的促进作用,说明重组菌株能够表达具有生物活性的hαFGF。SDS-PAGE结果表明,hαFGF表达产物约占菌体总蛋白的15%。hαFGF表达产物以包涵体的形式存在。
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关 键 词: | αFGF 基因重组和表达 |
收稿时间: | 1991-12-20 |
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