| 鸡Toll样受体21单克隆抗体的研制及其初步应用 |
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| 引用本文： | 张鹏池,陈小雅,王航,李林,蒋路遥,吴佳炎,黄恩赐,高崧,刘秀梵.鸡Toll样受体21单克隆抗体的研制及其初步应用[J].微生物学报,2022,62(7):2824-2834. |
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| 作者姓名： | 张鹏池 陈小雅 王航 李林 蒋路遥 吴佳炎 黄恩赐 高崧 刘秀梵 |
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| 作者单位： | 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心, 江苏 扬州 225009;农业农村部禽用生物制剂创制重点实验室, 江苏 扬州 225009;扬州大学兽医学院, 江苏 扬州 225009;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心, 江苏 扬州 225009;农业农村部禽用生物制剂创制重点实验室, 江苏 扬州 225009;扬州大学兽医学院, 江苏 扬州 225009;扬州大学农业科技发展研究院, 江苏 扬州 225009 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31972711);国家重点研发计划(2021YFD1800404);江苏高校优势学科建设工程资助项目 |
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| 摘 要： | 【目的】研制鸡Toll样受体21(chTLR21)单克隆抗体，考察禽致病性大肠杆菌(APEC)及高致病性禽流感病毒(HPAIV)感染鸡组织中的chTLR21蛋白的表达情况。【方法】以人工合成的多肽免疫原chTLR21(203–225aa)与KLH偶联蛋白免疫6周龄BALB/c小鼠，以多肽免疫原chTLR21 (203–225 aa)与BSA偶联蛋白作为检测抗原，通过间接ELISA技术筛选阳性杂交瘤细胞株，同时，采用间接免疫荧光技术(IFA)检测单克隆抗体的荧光反应性；上述单克隆抗体用于chTLR21在鸡巨噬细胞(HD11)中的定位；在APEC O1血清型E516菌株、HPAIV H5N6亚型毒株感染35日龄SPF鸡模型中，应用获得的单克隆抗体以免疫印迹(Western blotting)和免疫组化(IHC)方法检测感染鸡组织中chTLR21的表达情况。【结果】建立了间接ELISA检测方法，确定最适抗原包被浓度为2.5μg/mL，最适血清稀释度为1:6400。经ELISA、IFA筛选，获得4株阳性杂交瘤细胞株，分别命名为1G3、2C10、3B6和4F11。上述单克隆抗体亚类分别为IgG2...
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| 关 键 词： | chTLR21 单克隆抗体 细胞定位 免疫印迹 免疫组化 |
| 收稿时间： | 2021/11/29 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2022/1/10 0:00:00 |
Preparation and preliminary application of monoclonal antibodies against chicken Toll-like receptor 21 |
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| ZHANG Pengchi,CHEN Xiaoy,WANG Hang,LI Lin,JIANG Luyao,WU Jiayan,HUANG Enci,GAO Song,LIU Xiufan.Preparation and preliminary application of monoclonal antibodies against chicken Toll-like receptor 21[J].Acta Microbiologica Sinica,2022,62(7):2824-2834. |
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| Authors: | ZHANG Pengchi CHEN Xiaoy WANG Hang LI Lin JIANG Luyao WU Jiayan HUANG Enci GAO Song LIU Xiufan |
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| Institution: | Jiangsu Co-Innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses, Yangzhou 225009, Jiangsu, China;Key Laboratory of Avian Bioproducts Development, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Yangzhou 225009, Jiangsu, China;College of Veterinary Medicine, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu, China;Jiangsu Co-Innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses, Yangzhou 225009, Jiangsu, China;Key Laboratory of Avian Bioproducts Development, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Yangzhou 225009, Jiangsu, China;College of Veterinary Medicine, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu, China;Institutes of Agricultural Science and Technology Development, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | chTLR21 monoclonal antibody subcellular localization Western blotting immunohistochemistry |
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