不同分子量γ-聚谷氨酸的生物合成 |
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作者姓名: | 陈升宝 王丽敏 于波 |
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作者单位: | 中国科学院微生物研究所, 中国科学院微生物生理与代谢工程重点实验室, 北京 100101;中国科学院大学, 北京 100049 |
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基金项目: | 山东省重大科技创新工程项目(2019JZZY011004);国家自然科学基金(32070026) |
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摘 要: | 【背景】不同分子量的γ-聚谷氨酸在农业、化妆品和医药领域具有重要的应用价值,开发不同分子量γ-聚谷氨酸的生物合成工艺已成为研究热点。【目的】在γ-聚谷氨酸生产菌株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) KH2中实现不同分子量γ-聚谷氨酸的合成。【方法】分别克隆表达不同来源的水解酶,包括B.subtilis来源的γ-聚谷氨酸水解酶PgdS和YwtE,以及地衣芽孢杆菌来源的SGH。研究不同来源水解酶对B. subtilis KH2产γ-聚谷氨酸分子量的影响。通过改变水解酶处理条件获得不同分子量γ-聚谷氨酸的生物合成工艺。【结果】PgdS、YwtE和SGH均可降低γ-聚谷氨酸的分子量,其中PgdS水解效果最好,可以将γ-聚谷氨酸分子量由原来的1 600 kDa降低为180 kDa。通过优化PgdS的添加量与添加时间,在B. subtilis KH2中获得了分子量为210–600 kDa的γ-聚谷氨酸。【结论】利用水解酶处理,可以在B. subtilis KH2中实现不同分子量γ-聚谷氨酸的生物合成。该方法反应条件温和、分子量可控区间宽,具有良好的应用前景。
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关 键 词: | γ-聚谷氨酸 分子量 水解酶 枯草芽孢杆菌 |
收稿时间: | 2021-11-18 |
修稿时间: | 2021-12-07 |
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