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大肠杆菌Zn2+敏感突变株构建及其功能验证
引用本文:王玉婷,徐桐,华贝杰,姜巨全. 大肠杆菌Zn2+敏感突变株构建及其功能验证[J]. 微生物学通报, 2022, 49(7): 2538-2549
作者姓名:王玉婷  徐桐  华贝杰  姜巨全
作者单位:东北农业大学生命科学学院, 黑龙江 哈尔滨 150030;中国科学院微生物研究所, 北京 100101
基金项目:国家自然科学基金(32070031,31770051)
摘    要:【背景】Zn2+在细胞解毒及许多生理过程中发挥着关键作用,Zn2+转运蛋白已逐渐引起人们的重视。在大肠杆菌中,zntA和zitB是2个外排Zn2+的关键基因。【目的】构建大肠杆菌Zn2+敏感突变株,并对其功能进行验证。【方法】以Escherichia coli DH5α为出发菌株,利用λ Red重组系统,通过携带卡那霉素抗性基因的同源重组片段敲除zntA基因。在单基因敲除菌株基础上,利用携带庆大霉素抗性基因的同源重组片段敲除zitB基因,获得一株敲除了zntA和zitB的双基因敲除菌株KZAB04。通过功能互补实验检测基因敲除菌株及对照菌株对不同浓度Zn2+的敏感程度。【结果】基因敲除菌株KZAB04比出发菌株E. coli DH5α具有更高的Zn2+敏感性。【结论】大肠杆菌Zn2+敏感突变株构建成功。该菌株的构建为zntA和zitB基因功能的研究提供了必要条件,同时也为其他Zn2+转运蛋白基因的功能鉴定与分析奠...

关 键 词:基因敲除  λ Red重组  Zn2+转运蛋白  zntA  zitB
收稿时间:2021-11-12

Construction and functional verification of a Zn2+ sensitive mutant of Escherichia coli
WANG Yuting,XU Tong,HUA Beijie,JIANG Juquan. Construction and functional verification of a Zn2+ sensitive mutant of Escherichia coli[J]. Microbiology China, 2022, 49(7): 2538-2549
Authors:WANG Yuting  XU Tong  HUA Beijie  JIANG Juquan
Affiliation:College of Life Sciences, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, Heilongjiang, China;Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China
Abstract:
Keywords:
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