Ⅱ型肺泡细胞特异表达SARS冠状病毒核衣壳蛋白转基因小鼠的建立 |
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引用本文: | 潘晓晨,王友亮,程萱,侯宁,崔芳,时令,刘伯华,祝庆余,秦鄂德,杨晓.Ⅱ型肺泡细胞特异表达SARS冠状病毒核衣壳蛋白转基因小鼠的建立[J].生物技术通讯,2006,17(4):516-519. |
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作者姓名: | 潘晓晨 王友亮 程萱 侯宁 崔芳 时令 刘伯华 祝庆余 秦鄂德 杨晓 |
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作者单位: | 1. 军事医学科学院,生物工程研究所,北京,100071 2. 军事医学科学院,微生物流行病研究所,北京,100071 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展规划SARS专项基金项目(2003CB514131) |
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摘 要: | 目的:建立Ⅱ型肺泡细胞特异表达SARS冠状病毒(SARS-CoV)核衣壳蛋白(N蛋白)的转基因小鼠。方法:用分子克隆的方法构建包括肺表面活性蛋白A(SP-A)启动子、SARS-CoVN蛋白基因、β-半乳糖苷酶(LacZ)报告基因和人生长激素(hGH)polyA的转基因载体pSP-A-N。以显微注射的方法将8.3kb的转基因片段引入小鼠受精卵。通过PCR、Southern印迹和LacZ染色检测子代小鼠中转基因的整合及表达。结果:共注射952枚受精卵,移植至42只假孕母小鼠的输卵管中发育,获得子代小鼠128只,经PCR、Southern印迹鉴定,其中11只小鼠基因组上整合有SARS-CoVN蛋白基因,整合率为8.6%。鉴定结果显示,11只转基因首建者小鼠中有1只表达外源基因并能正常传代。LacZ染色结果表明N蛋白基因在转基因小鼠Ⅱ型肺上皮细胞中特异表达。结论:成功构建了Ⅱ型肺泡细胞特异表达SARS-CoVN蛋白的转基因小鼠,为深入研究该基因的病理生理学效应奠定了基础。
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关 键 词: | SARS冠状病毒 核衣壳蛋白 转基因小鼠 肺表面活性蛋白A |
文章编号: | 1009-0002(2006)04-0516-04 |
收稿时间: | 02 12 2006 12:00AM |
修稿时间: | 2006年2月12日 |
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