| 纤维素酶基因在毕赤酵母中的拷贝数对其表达的影响 |
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| 引用本文： | 李兵,庄国强,林建强,曲音波.纤维素酶基因在毕赤酵母中的拷贝数对其表达的影响[J].生物加工过程,2006,4(4):12-16. |
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| 作者姓名： | 李兵 庄国强 林建强 曲音波 |
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| 作者单位： | 山东大学,微生物技术国家重点实验室,济南,250100 |
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| 基金项目： | 国家973项目(No.2003CB716000)，国家自然科学基金项目(No.30370036)，山东大学微生物技术国家重点实验室开放基金项目 |
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| 摘 要： | 将PCR扩增得到的瑞氏木霉纤维素内切酶Ⅲ(Endo--β1,4-glucanaseⅢ,EGⅢ)基因片段插入巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)质粒pPIC9K中,构建了EGⅢ的分泌表达质粒pPIC9K-eg3,然后经线性化后电转化导入P.pastorisGS115受体菌中。获得的阳性克隆经SDS-PAGE和酶活检测,证明工程菌株发酵上清液中含有表达的EGⅢ蛋白并具有纤维素内切酶酶活。通过荧光定量PCR确定了各菌株的拷贝数并对不同拷贝数范围的菌体生长和EGⅢ的表达做了比较。实验结果表明,低拷贝重组菌有着相对较好的EGⅢ表达量。
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| 关 键 词： | 内切纤维素酶EGⅢ 巴斯德毕赤酵母 表达 拷贝数 |
| 文章编号： | 1672-3678（2006）04-0012-05 |
| 收稿时间： | 2006-06-15 |
| 修稿时间： | 2006年6月15日 |
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