干扰素诱导蛋白P56与糖皮质激素受体的相互作用及对其转录活性的影响 |
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引用本文: | 李淑蓉,粟永萍,刘晓宏,楼淑芬,程天民.干扰素诱导蛋白P56与糖皮质激素受体的相互作用及对其转录活性的影响[J].生物化学与生物物理进展,2004,31(9):791-795. |
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作者姓名: | 李淑蓉 粟永萍 刘晓宏 楼淑芬 程天民 |
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作者单位: | 第三军医大学全军复合伤研究所,重庆,400038 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展规划项目(973)(G1999054201). |
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摘 要: | 糖皮质激素受体(GR)在严重创伤早期及全身性炎症反应中具有重要作用,为寻找与GR相互作用的新的蛋白质,以期调节GR的功能活性,应用酵母双杂交技术,以糖皮质激素受体配体结合区(GR-LBD)为诱饵蛋白,在人骨髓cDNA文库中筛选到42个阳性克隆.测序结果表明,其中一个克隆为干扰素诱导蛋白P56的大部分编码序列(221~1 642 bp,编码第53位至第478位氨基酸).利用酵母双杂交实验再次验证P56与GR具有结合作用.并用PCR方法从酵母质粒中扩增出P56片段,进行GST-P56原核融合蛋白表达与纯化,及真核表达与免疫共沉淀.蛋白质结合实验表明,P56与GR-LBD在体内外有结合作用.CAT报告基因检测表明P56抑制GR的转录激活能力.
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关 键 词: | 糖皮质激素受体,干扰素诱导蛋白P56,酵母双杂交系统,转录活性 |
收稿时间: | 2004/2/17 0:00:00 |
修稿时间: | 2004/5/28 0:00:00 |
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