双重荧光定量一步RT-PCR法同时检测GⅠ、GⅡ型诺如病毒 |
| |
引用本文: | 周冬梅,靳淼,李慧莹,徐子乾,段招军.双重荧光定量一步RT-PCR法同时检测GⅠ、GⅡ型诺如病毒[J].病毒学报,2013(3):310-315. |
| |
作者姓名: | 周冬梅 靳淼 李慧莹 徐子乾 段招军 |
| |
作者单位: | 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 |
| |
基金项目: | 国家自然科学基金项目(81000727);国家科技重大专项(2012ZX10004215) |
| |
摘 要: | 建立一种可同时检测诺如病毒GⅠ和GⅡ型的双重荧光定量一步法RT-PCR方法。应用针对GⅠ型和GⅡ型诺如病毒的特异性引物以及Taqman探针,优化反应体系及条件,建立双重荧光定量一步法RT-PCR方法。对该方法的灵敏度、特异性、重复性进行评估,并对粪便标本进行检测,以传统RT-PCR方法作为参考评价此方法。结果表明,该方法特异性强,与肠道腺病毒、轮状病毒、星状病毒均无交叉反应,对GⅠ和GⅡ型诺如病毒核酸的最低检出限分别可达103拷贝/μL,具有很好的重复性。对100份粪便标本进行检测,诺如病毒的阳性率为31%,其中GⅠ型为3%,GⅡ型为28%,而传统RT-PCR法的检出率为22%。本文建立的双重荧光定量一步RT-PCR法能同时对GI和GII型诺如病毒进行快速检测,其灵敏度高、特异性好,可应用于胃肠炎病人中检测诺如病毒。
|
关 键 词: | 诺如病毒 双重荧光定量 一步法 RT-PCR GⅠ型 GⅡ型 |
本文献已被 CNKI 等数据库收录! |
|