| 金花茶FLS基因的克隆及其植物表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 周兴文,李纪元,殷恒福,范正琪,李辛雷.金花茶FLS基因的克隆及其植物表达载体的构建[J].植物研究,2013,33(1):58-65. |
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| 作者姓名： | 周兴文 李纪元 殷恒福 范正琪 李辛雷 |
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| 作者单位： | 中国林业科学研究院亚热带林业研究所;广西玉林师范学院 |
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| 基金项目： | 国家国际科技合作项目(2011DFA30490);国家十二五科技计划课题(2012BA01B0703);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金(RISF6141);广西自然科学基金项目(2012GXNSFBA053077) |
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| 摘 要： | 利用RT-PCR和RACE技术，从我国珍稀濒危植物金花茶花瓣中获得了黄酮醇合成酶（Flavonol synthase，FLS）基因的cDNA全长，命名为CnFLS，GenBank登录号JF343560.1。根据该基因序列设计全长扩增引物P3/P4进行PCR扩增，将扩增产物插入PMD18-T载体并转化克隆菌株DH5α，提取质粒DNA酶切鉴定，通过酶切连接的方法将该基因与改造后的pCAMBIA1300表达载体连接，成功构建了该基因的正义表达载体pCAM-CnFLS。根据该基因的保守序列设计了含有酶切位点的特异引物G1/G2，扩增出250 bp的干扰片段并将其克隆到PMD18-T载体，在中间载体pUCCRNAi及表达载体pCAMBIA1300的基础上，通过多次酶切连接，成功构建了金花茶FLS基因的干扰表达载体pCAMRNAi-CnFLS。金花茶正义及干扰植物表达载体的成功构建，为进一步研究该基因的功能及其对花色的调控效应奠定了基础。
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| 关 键 词： | 金花茶 黄酮醇合成酶 RNA干扰 表达载体构建 |
Cloning of Camellia nitidissima Flavonol Synthase cDNA and Construction of Sense,RNA Interference Expression Vectors |
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| ZHOU Xing-Wen,LI Ji-Yuan, Yin Heng-Fu,FAN Zheng-Qi,Li Xin-Lei.Cloning of Camellia nitidissima Flavonol Synthase cDNA and Construction of Sense,RNA Interference Expression Vectors[J].Bulletin of Botanical Research,2013,33(1):58-65. |
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| Authors: | ZHOU Xing-Wen LI Ji-Yuan Yin Heng-Fu FAN Zheng-Qi Li Xin-Lei |
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| Institution: | 1(1.Research Institute of Subtropical Forestry,Chinese Academy of Forestry,Fuyang 311400;2.Yulin Normal University,Yulin 537000) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Camellia nitidissima Chi flavonol synthase RNA interference construction of expression vector |
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