| 猪克隆胚胎激活方法优化与转人溶菌酶基因克隆猪的生产 |
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| 引用本文： | 卫恒习,李俊,童佳,马育芳,高凤磊,李秋艳,张守全,李宁.猪克隆胚胎激活方法优化与转人溶菌酶基因克隆猪的生产[J].生物化学与生物物理进展,2013,40(1):72-79. |
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| 作者姓名： | 卫恒习 李俊 童佳 马育芳 高凤磊 李秋艳 张守全 李宁 |
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| 作者单位： | 广东省农业动物基因组学与分子育种重点实验室，华南农业大学动物科学学院，广州 510642；农业生物技术国家重点实验室，中国农业大学生物学院，北京 100193,农业生物技术国家重点实验室，中国农业大学生物学院，北京 100193； 河北医科大学第一医院生殖医学中心，石家庄 050031,农业生物技术国家重点实验室，中国农业大学生物学院，北京 100193,农业生物技术国家重点实验室，中国农业大学生物学院，北京 100193,广东省农业动物基因组学与分子育种重点实验室，华南农业大学动物科学学院，广州 510642,农业生物技术国家重点实验室，中国农业大学生物学院，北京 100193,广东省农业动物基因组学与分子育种重点实验室，华南农业大学动物科学学院，广州 510642,农业生物技术国家重点实验室，中国农业大学生物学院，北京 100193 |
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| 基金项目： | 国家转基因育种重大专项(2008ZX08006-001), 国家重点基础研究发展计划(973)(2011CB944202)和广东省自然科学基金(S2011040001123) 资助项目 |
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| 摘 要： | 为了提高转基因克隆效率和获得转人溶菌酶基因克隆猪,研究了不同电激活参数和化学辅助激活方法对猪克隆胚胎和孤雌胚胎体外发育的影响.结果发现:电场强度会显著影响克隆胚胎的融合率和体外发育能力(P<0.05),电脉冲次数对克隆胚胎体外发育促进作用不显著(P>0.05),而相同电激活条件下克隆胚胎和孤雌胚胎的体外发育能力变化趋势不同;电激活后再利用放线菌酮+细胞松弛素B(CHX+CB)处理4 h能显著提高克隆胚胎的囊胚率(P<0.05),而用二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)处理没有提高克隆胚胎囊胚率(P>0.05),但6-DMAP或CHX+CB处理均可显著提高孤雌胚胎的囊胚率(P<0.05).上述结果表明,最佳的孤雌激活条件并不一定是克隆胚胎的最佳激活条件.本研究中猪克隆胚胎的最佳激活方法为1.6 kV/cm、100μs、2次直流电脉冲间隔100μs,再辅以CHX+CB处理4 h.利用优化的激活条件成功获得了乳腺特异表达人溶菌酶的转基因猪,为猪转基因育种奠定了基础.
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| 关 键 词： | 体细胞克隆 胚胎激活 转基因 人溶菌酶 猪 |
| 收稿时间： | 2012/2/17 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2012/8/21 0:00:00 |
Optimizing of Activation Protocols and Production of Transgenic Pigs Expressing Human Lysozyme by Somatic Cell Nuclear Transfer |
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| WEI Heng-Xi,LI Jun,TONG Ji,MA Yu-Fang,GAO Feng-Lei,LI Qiu-Yan,ZHANG Shou-Quan and LI Ning.Optimizing of Activation Protocols and Production of Transgenic Pigs Expressing Human Lysozyme by Somatic Cell Nuclear Transfer[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2013,40(1):72-79. |
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| Authors: | WEI Heng-Xi LI Jun TONG Ji MA Yu-Fang GAO Feng-Lei LI Qiu-Yan ZHANG Shou-Quan and LI Ning |
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| Institution: | Guangdong Provincial Key Laboratory of Agro-Animal Genomics and Molecular Breeding, College of Animal Science,South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China;State Key Laboratory for Agrobiotechnology and Department of Animal Physiology, China Agricultural University, Beijing 100193, China,State Key Laboratory for Agrobiotechnology and Department of Animal Physiology, China Agricultural University, Beijing 100193, China;Reproductive medical center, 1st hospital of Hebei medical university, Shijiazhuang 050031, China,State Key Laboratory for Agrobiotechnology and Department of Animal Physiology, China Agricultural University, Beijing 100193, China,State Key Laboratory for Agrobiotechnology and Department of Animal Physiology, China Agricultural University, Beijing 100193, China,Guangdong Provincial Key Laboratory of Agro-Animal Genomics and Molecular Breeding, College of Animal Science,South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China,State Key Laboratory for Agrobiotechnology and Department of Animal Physiology, China Agricultural University, Beijing 100193, China,Guangdong Provincial Key Laboratory of Agro-Animal Genomics and Molecular Breeding, College of Animal Science,South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China and State Key Laboratory for Agrobiotechnology and Department of Animal Physiology, China Agricultural University, Beijing 100193, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | somatic cell nuclear transfer embryo activation transgene human lysozyme pig |
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