| 冻存后脐血NK细胞的培养及CAR-NK的功能初探 |
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| 引用本文： | 张月琴,蒙露,赵日,毛娟,刘琴,周丹,刘洋,邹强.冻存后脐血NK细胞的培养及CAR-NK的功能初探[J].中国细胞生物学学报,2022(10):1916-1924. |
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| 作者姓名： | 张月琴 蒙露 赵日 毛娟 刘琴 周丹 刘洋 邹强 |
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| 作者单位： | 1. 成都医学院药学院;2. 成都优赛诺生物科技有限公司;3. 成都医学院基础医学院;4. 西南交通大学医学院;5. 川北医学院 |
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| 摘 要： | 该研究优化冻存后脐血NK细胞的培养条件,构建了靶向CD19的CAR-NK细胞,并探究了CD19-CAR-NK对CD19+ B细胞淋巴瘤的杀伤作用。首先将冻存的脐血单个核细胞复苏并静置18 h,通过CD56磁珠纯化NK细胞,使其在CBMC中的比例从13.8%提高至96.6%。然后比较使用不同细胞因子及其组合对NK细胞增殖、分化、凋亡及功能的影响,发现IL-2和IL-15均能活化NK细胞,但IL-2培养时NK细胞增殖优于IL-15(P<0.05),IL-2+15下CD56dim NK亚群占比(74.33±5.03)%]最多,凋亡(4.6±0.14)%]最少,累计增殖(62.67±3.21)倍,显著优于其他细胞因子组合(P<0.05)。该研究使用PDK1抑制剂BX795提高CAR-19慢病毒载体对NK细胞的转导效率,发现6 μmol/L BX795可将病毒转导效率提高3.6倍,且在此浓度下病毒转导效率(36.4±1.91)%]最大。最后在体外验证CD19-CAR-NK对CD19+肿瘤细胞的杀伤能力,发现CD19-CAR-NK可增强...
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| 关 键 词： | CD19 自然杀伤细胞 脐带血 免疫细胞治疗 |
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