| 噬菌体重组酶介导的DNA同源重组工程 |
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| 引用本文： | 李瑞娟,赵晓雨,杨润雨,刘洋,颜富,王海龙,张友明,符军. 噬菌体重组酶介导的DNA同源重组工程[J]. 微生物学通报, 2021, 48(9): 3230-3248 |
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| 作者姓名： | 李瑞娟 赵晓雨 杨润雨 刘洋 颜富 王海龙 张友明 符军 |
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| 作者单位： | 山东大学微生物技术国家重点实验室 山东 青岛 266237 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划（2019YFA0904000，2018YFA0900400）；山东省泰山学者工程；山东省自然科学基金面上项目（ZR2020MC015）；山东大学基本科研业务费（2018GN021） |
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| 摘 要： | 来源于噬菌体的遗传操作工具在基因工程中具有非常重要的地位,例如位点特异性重组酶、柯斯质粒DNA文库及同源重组酶等。其中,来源于Lambda噬菌体的同源重组酶Redα/Redβ和来源于Rac原噬菌体的同源重组酶RecE/RecT能够高效地介导35–50bp短同源臂之间的重组。基于噬菌体同源重组酶Redα/Redβ和RecE/RecT开发的DNA同源重组工程(Recombineering)能够对靶标DNA分子进行快速、精准、高效的修饰,不受限制性内切酶识别位点和DNA分子大小限制,已发展成为一种新型的基因工程技术。本文主要综述了噬菌体同源重组酶及其作用机制、在大肠杆菌及其他细菌中的应用和开发,以及在微生物次级代谢产物的挖掘、动植物转基因、病毒基因组克隆和修饰等方面的应用。原位激活沉默基因簇需要宿主特异性的DNA同源重组工程进行启动子和调控元件的修饰;异源表达次级代谢产物的首要步骤一般是通过RecET直接克隆大的DNA片段;动植物转基因复杂载体的构建效率在有了Red同源重组系统以后有了革命性的发展;RecET直接克隆和Red同源重组介导的感染性克隆构建和修饰方法,不仅有利于病毒基因组功能研究...
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| 关 键 词： | 噬菌体同源重组酶 同源重组工程 Red系统 RecET系统 次级代谢产物 动植物转基因 病毒反向遗传学 |
| 收稿时间： | 2021-05-07 |
Recombineering mediated by bacteriophage recombinases |
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| LI Ruijuan,ZHAO Xiaoyu,YANG Runyu,LIU Yang,YAN Fu,WANG Hailong,ZHANG Youming,FU Jun. Recombineering mediated by bacteriophage recombinases[J]. Microbiology China, 2021, 48(9): 3230-3248 |
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| Authors: | LI Ruijuan ZHAO Xiaoyu YANG Runyu LIU Yang YAN Fu WANG Hailong ZHANG Youming FU Jun |
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| Affiliation: | State Key Laboratory of Microbial Technology, Shandong University, Qingdao, Shandong 266237, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | bacteriophage homologous recombinases recombineering red system RecET system secondary metabolites animal and plant transgenesis virus reverse genetics |
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