农杆菌介导的棉花枯萎病菌转化体系的优化 |
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引用本文: | 刘叶,阿依保他·托合达白,郭楠楠,柳自清,张博然,朱琦,顾爱星. 农杆菌介导的棉花枯萎病菌转化体系的优化[J]. 微生物学通报, 2021, 48(9): 2991-3001 |
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作者姓名: | 刘叶 阿依保他·托合达白 郭楠楠 柳自清 张博然 朱琦 顾爱星 |
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作者单位: | 新疆农业大学农学院 新疆 乌鲁木齐 830052;农林有害生物监测与安全防控重点实验室 新疆 乌鲁木齐 830052;新疆农业大学农学院 棉花教育部工程研究中心 新疆 乌鲁木齐 830052 |
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基金项目: | 新疆维吾尔自治区博士后科研流动站资助;转基因生物新品种培育科技重大专项(2018ZX0800501B) |
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摘 要: | 【背景】海岛棉相对陆地棉更易感枯萎病,一旦发生很难根治,使得枯萎病逐渐成为威胁新疆海岛棉产业发展的主要病害,但其致病机理目前还不是十分明确。【目的】揭示棉花枯萎病菌的遗传变异和致病机理,同时获得带有绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein,GFP)标记的棉花枯萎病菌转化子用于观察其侵染海岛棉的途径。【方法】采用农杆菌介导的遗传转化(Agrobacterium tumefaciens-Mediated Transformation,ATMT)方法,对棉花枯萎病菌7号生理小种st89进行了遗传转化并对转化条件进行优化。【结果】农杆菌介导的遗传转化法转化棉花枯萎病菌的最佳条件为:150 mg/L的潮霉素浓度能完全抑制棉花枯萎病菌的生长,浓度为200 mg/L的头孢噻肟钠能完全抑制农杆菌LBA4404生长,农杆菌起始浓度OD600为0.2,农杆菌预培养时间为8 h,棉花枯萎病菌分生孢子浓度为105个/mL,枯萎病菌孢子悬液和农杆菌LBA4404比例为1:1,乙酰丁香酮浓度为200μmol/mL,共培养时间为4 d,转化后培养温...
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关 键 词: | 棉花枯萎病菌 绿色荧光蛋白 农杆菌介导的遗传转化 |
收稿时间: | 2020-12-16 |
Optimization of Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation system for Fusarium oxysporum |
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Affiliation: | College of Agriculture, Xinjiang Agricultural University, Urumqi, Xinjiang 830052, China;Key Laboratory of the Pest Monitoring and Safety Control of Crops and Forests of the Universities of the Xinjiang Uygur Autonomous Region, Urumqi, Xinjiang 830052, China;Engineering Research Centre of Cotton, Ministry of Education, College of Agriculture, Xinjiang Agricultural University, Urumqi, Xinjiang 830052, China |
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Abstract: | |
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Keywords: | Fusarium oxysporum green fluorescent protein Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation |
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