| 一种高效、快捷、经济的小鼠胰岛细胞分离纯化方法 |
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| 引用本文： | 徐小明,林戈,段馨,卢光琇.一种高效、快捷、经济的小鼠胰岛细胞分离纯化方法[J].生命科学研究,2011,15(1):46-50. |
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| 作者姓名： | 徐小明 林戈 段馨 卢光琇 |
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| 作者单位： | 1. 中南大学生殖与干细胞工程研究所,中国湖南,长沙,410008;中南大学人类干细胞国家工程研究中心,中国湖南,长沙,410008
2. 中南大学生殖与干细胞工程研究所,中国湖南,长沙,410008 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划“973”项目(2005CB522705); 国家自然科学基金资助项目(30800650); 湖南省自然科学基金资助项目(09JJ4010) |
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| 摘 要： | 采用改良的胶原酶P胆总管内逆行灌注膨胀胰腺的分离方法,比较Ficoll-400不连续密度梯度离心法和人工挑取法两种纯化胰岛的方法,用双硫腙(DTZ)对胰岛细胞团进行特异性染色计算胰岛产量及纯度,用台盼蓝染色判定胰岛细胞活性,使用间接免疫荧光法检测体外培养7 d后胰岛的功能.采用人工挑取法平均每只小鼠可获取的胰岛细胞团(245±35.6个)明显高于密度梯度离心法(120±26.3个)(n=5,P<0.05),两种方法分离纯化的胰岛活力均大于98%;但人工挑取法获得胰岛细胞团的纯度(100%)要高于密度梯度离心法(90%);纯化胰岛所用时间,采用人工挑取法(22±4 min)也少于密度梯度离心法(31±3 min).间接免疫荧光染色检测体外培养7 d后的胰岛细胞团,两种方法分离纯化的胰岛细胞团均具有良好的功能.胶原酶P胆总管内灌注消化分离法联合人工挑取纯化胰岛细胞团的方法,是一种高效、快捷、经济的小鼠胰岛细胞团分离纯化方法.
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| 关 键 词： | 胰岛 分离纯化 小鼠 |
An Efficient, Fast and Economic Method for Isolation and Purification of Mouse Islet Cell Masses |
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| XU Xiao-ming,LIN Ge,DUAN Xin,LU Guang-xiu.An Efficient, Fast and Economic Method for Isolation and Purification of Mouse Islet Cell Masses[J].Life Science Research,2011,15(1):46-50. |
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| Authors: | XU Xiao-ming LIN Ge DUAN Xin LU Guang-xiu |
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| Institution: | XU Xiao-minga,b,LIN Gea,DUAN Xina,LU Guang-xiua,b(a.Institute of Reproductive and Stem Cell Engineering,b.National Engineering and Research Center of Human Stem Cells,Central South University,Changsha 410008,Hunan,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | islet isolation and purification mouse |
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