小分子伴侣协助重组人γ-干扰素体外复性研究 |
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作者姓名: | 关怡新 费峥峥 罗曼 姚善泾 |
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作者单位: | 浙江大学化学工程与生物工程学系,杭州,310027 |
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基金项目: | 浙江省自然科学基金(201099)和教育部留学回国人员科研启动基金资助项目. |
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摘 要: | 考察了小分子伴侣在游离和固定化两种情况下,对重组人γ-干扰素(rhIFN-γ)体外重折叠复性的作用.实验结果表明,小分子伴侣GroEL191~345的加入有效地促进了rhIFN-γ的复性,在初始蛋白质浓度为100 mg/L时,rhIFN-γ复性后蛋白质回收率提高了2.2倍,总活性提高了近3倍;将小分子伴侣固定化在NHS-activated Sepharose Fast Flow凝胶后,不但能重复利用,而且进一步提高了rhIFN-γ复性效率,在初始蛋白质浓度为400 mg/L 时,仍使蛋白质回收率达到46.29%和比活达到1.95×107 U/mg.
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关 键 词: | 小分子伴侣GroEL191~345,重组人γ-干扰素,复性,包涵体 |
收稿时间: | 2004-04-26 |
修稿时间: | 2004-06-30 |
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