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丝状真菌Podospora anserina AA11家族裂解多糖单加氧酶基因的鉴定和功能研究
作者姓名:杜文珍  李元敬  吴佳玲  陈思羽  姜亮  刘刚  谢宁
作者单位:1. 深圳大学生命与海洋科学学院,深圳市微生物基因工程重点实验室;2. 华南师范大学材料与新能源学院
基金项目:国家重点研发计划项目(编号:2021YFA0910800);;广东省自然科学基金项目(编号:2021A1515012166,2021A1515012118);;国家自然科学基金项目(编号:31601014,22078199)资助~~;
摘    要:辅助活性蛋白家族(auxiliary activity family, AA family)中的裂解多糖单加氧酶(lytic polysaccharide monooxygenase, LPMO)能催化纤维素、几丁质和淀粉等多种难降解碳水化合物的氧化解聚。尽管目前对LPMO的酶学研究较多,但对LPMO基因失活的研究却鲜有报道。本研究利用同源重组方法定点敲除丝状真菌Podospora anserina中AA11家族的5个LPMO基因PaLPMO11A(Pa_4_4790)、PaLPMO11B(Pa_1_5310)、PaLPMO11C(Pa_2_7840)、 PaLPMO11D(Pa_2_8610)和PaLPMO11E(Pa_3_9420),分别构建了单突变体ΔPaLPMO11A (ΔA)、ΔPaLPMO11B (ΔB)、ΔPaLPMO11C (ΔC)、ΔPaLPMO11D (ΔD)和ΔPaLPMO11E (ΔE),然后通过遗传杂交构建所有多基因突变体。通过在不同碳源培养基上的表型分析、DAB和NBT染色以及纤维素酶活测定分析野生型菌株与突变型菌株在生长速率、有性生殖、氧化应激和纤维素降解...

关 键 词:丝状真菌  Podospora anserina  LPMO11  基因敲除  木质纤维素降解
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