| 米曲霉（Aspergillus oryzae）果胶酸内切水解酶（PGA）在原核系统中重组表达 |
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| 引用本文： | 张宇玲,赵庆新,朱泓,孙静,韩丰敏,袁生. 米曲霉（Aspergillus oryzae）果胶酸内切水解酶（PGA）在原核系统中重组表达[J]. 微生物学报, 2007, 23(1) |
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| 作者姓名： | 张宇玲 赵庆新 朱泓 孙静 韩丰敏 袁生 |
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| 作者单位： | 江苏省生物多样性和生物技术重点实验室，南京师范大学生命科学学院微生物工程重点实验室， 南京 210097;江苏省生物多样性和生物技术重点实验室，南京师范大学生命科学学院微生物工程重点实验室， 南京 210097;江苏省生物多样性和生物技术重点实验室，南京师范大学生命科学学院微生物工程重点实验室， 南京 210097;江苏省生物多样性和生物技术重点实验室，南京师范大学生命科学学院微生物工程重点实验室， 南京 210097;江苏省生物多样性和生物技术重点实验室，南京师范大学生命科学学院微生物工程重点实验室， 南京 210097;江苏省生物多样性和生物技术重点实验室，南京师范大学生命科学学院微生物工程重点实验室， 南京 210097 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(No.30170005)和江苏省自然科学基金(No.BK2005136)。 |
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| 摘 要： | 果胶酶具有广阔的商业用途，在食品工业上主要用于果汁和酒类的澄清、提高植物油的提取率、提高水果的硬度和植物纤维脱胶。米曲霉（Aspergillus oryzae）一直用于传统发酵食品的生产，自然条件下其果胶酶的产量较低。文献报道的果胶酶的重组表达成功的例子较少，且活性较低。通过RT-PCR 的方法，获得不含信号肽的果胶酸内切水解酶A(polygalacturonase A, PGA) 的cDNA，PGA cDNA 连入pET-28a (+)载体, 构建 pET-28a (+)-pga 质粒。pET-28a (+)-pga 转化Turner (DE3) placⅠ细胞，得到转化子pET-28a (+)-pga-Turner (DE3) placⅠ，首次实现了米曲霉PGA在大肠杆菌系统中过表达，进一步对PGA在大肠杆菌系统中表达的条件进行了研究。在37℃、220 r/min条件培养pET-28a (+)-pga-Turner (DE3) placⅠ细胞，OD600至 0.8左右时，用500μmol/L isopropyl β-D-thiogalactogalactopyranoside (IPTG)进行诱导表达，在15℃和170r/min条件下继续培养24 h，表达效果最好，相对于每毫升培养基而言，产酶可达到70u/mL，是米曲霉自然条件产酶量的87.5倍，远优于文献报道的重组表达的PGA酶活
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| 关 键 词： | 米曲霉 果胶酸水解酶 大肠杆菌 原核表达 |
Expression of Endopolygalacturonase A of Aspergillus oryzae in Escherichia coli |
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| ZHANG Yu-Ling,ZHAO Qing-Xin,ZHU Hong,SUN Jing,HAN Feng-Min and YUAN Sheng. Expression of Endopolygalacturonase A of Aspergillus oryzae in Escherichia coli[J]. Acta microbiologica Sinica, 2007, 23(1) |
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| Authors: | ZHANG Yu-Ling ZHAO Qing-Xin ZHU Hong SUN Jing HAN Feng-Min YUAN Sheng |
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| Affiliation: | Jiangsu Key Laboratory for Biodiversity and Biotechnology, Key Laboratory for Microbial Technology in the College of Life Sciences, Nanjing Normal University, Nanjing 210097, China;Jiangsu Key Laboratory for Biodiversity and Biotechnology, Key Laboratory for Microbial Technology in the College of Life Sciences, Nanjing Normal University, Nanjing 210097, China;Jiangsu Key Laboratory for Biodiversity and Biotechnology, Key Laboratory for Microbial Technology in the College of Life Sciences, Nanjing Normal University, Nanjing 210097, China;Jiangsu Key Laboratory for Biodiversity and Biotechnology, Key Laboratory for Microbial Technology in the College of Life Sciences, Nanjing Normal University, Nanjing 210097, China;Jiangsu Key Laboratory for Biodiversity and Biotechnology, Key Laboratory for Microbial Technology in the College of Life Sciences, Nanjing Normal University, Nanjing 210097, China;Jiangsu Key Laboratory for Biodiversity and Biotechnology, Key Laboratory for Microbial Technology in the College of Life Sciences, Nanjing Normal University, Nanjing 210097, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Aspergillus oryzae polygalacturonase Escherichia coli expression |
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