| 靶向miRNA干扰Bmi-1诱导胆囊癌细胞凋亡及上调Caspase-3表达的研究 |
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| 引用本文： | 魏东,邹浩,王琳,王文举,骆志玲,张小文.靶向miRNA干扰Bmi-1诱导胆囊癌细胞凋亡及上调Caspase-3表达的研究[J].中国生物工程杂志,2013,33(12):1-8. |
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| 作者姓名： | 魏东 邹浩 王琳 王文举 骆志玲 张小文 |
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| 作者单位： | 1. 昆明医科大学第二附属医院 昆明 650101;2. 昆明医科大学附属延安医院中心实验室 昆明 650051;3. 昆明医科大学第一附属医院 昆明 650031 |
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| 基金项目： | 云南省科技计划项目（NO：2011FZ124）；云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项（2012FB050）资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:通过靶向抑制原癌基因Bmi-1表达,观察其诱导胆囊癌细胞凋亡及上调Caspase-3蛋白表达的效应,探讨其在胆囊癌形成中的机制。方法:通过前期成功构建miRNA-Bmi-1重组质粒转染GBC-SD细胞,然后将其分为miRNABmi-1、miRNAScramble、Lipofectamine、GBC-SD 4组,转染48h后采用RT-PCR和Western blot法检测各组Bmi-1mRNA和蛋白的表达,倒置显微镜观察细胞生长情况;流式细胞技术检测细胞的凋亡率、细胞周期分布及Caspase-3蛋白表达水平。结果:RT-PCR和Western blot结果显示miRNABmi-1组细胞Bmi-1 mRNA和蛋白的表达水平明显低于对照组(P0.05)。倒置显微镜观察显示miRNABmi-1组细胞死亡较对照组明显;细胞周期检测显示:miRNABmi-1组细胞阻滞于G0/G1(72.20±1.71),G2/M和S期细胞减少(18.30±7.21,9.50±6.01),凋亡指数增高(49.83±5.19),Caspase-3蛋白表达量明显增加(30.37±8.10),与对照组比较,具有显著性差异(P0.05)。结论:靶向沉默Bmi-1能有效抑制胆囊癌细胞Bmi-1mRNA及蛋白表达,诱导胆囊癌细胞凋亡,其机制可能是早期使胆囊癌细胞周期阻滞于G0/G1期,并上调了Caspase-3蛋白表达,Bmi-1可能参与调控线粒体依赖的凋亡途径。
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| 关 键 词： | GBC-SD Caspase-3蛋白 细胞凋亡 细胞周期 原癌基因Bmi-1 |
| 收稿时间： | 2013-10-08 |
Gallbladder Cancer Cell Apoptosis and Up-regulated Expression of Caspase-3 Induced by Interference of Targeting MiRNA on Bmi-1 |
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| WEI Dong,ZOU Hao,WANG Lin,WANG Wen-ju,Luo Zhi-ling,ZHANG Xiao-wen.Gallbladder Cancer Cell Apoptosis and Up-regulated Expression of Caspase-3 Induced by Interference of Targeting MiRNA on Bmi-1[J].China Biotechnology,2013,33(12):1-8. |
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| Authors: | WEI Dong ZOU Hao WANG Lin WANG Wen-ju Luo Zhi-ling ZHANG Xiao-wen |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Oncogene Bmi-1 GBC-SD Apoptosis Cell cycle Caspase-3 protein |
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