| 枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备及质粒转化方法研究 |
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| 引用本文： | 李瑞芳,薛雯雯,黄亮,熊前程,王彬. 枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备及质粒转化方法研究[J]. 生物技术通报, 2011, 0(5) |
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| 作者姓名： | 李瑞芳 薛雯雯 黄亮 熊前程 王彬 |
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| 作者单位： | 河南工业大学生物工程学院,郑州,450001 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，河南省重点科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 为便于枯草芽孢杆菌工业化生产应用,对Spizizen创立的枯草芽孢杆菌DNA转化方法进行改进.用GMI和GMII溶液处理枯草芽孢杆菌野生型菌株BS501a、营养缺陷型突变株DBl342和非营养缺陷型突变株WB800,用改进的方法制备感受态细胞,用7.5kb质粒pSBPTQ进行转化,并研究RNA、酵母粉、水解酪蛋白、培养方法对枯草芽孢杆菌质粒转化的影响.结果表明,该方法适用于不同基因型枯草芽孢杆菌的质粒转化,营养缺陷型突变株DBl342的转化率为750 CFU/μg/DNA,非营养缺陷型突变株WB800转化率为1 070 CFU/xg DNA,野生型菌株BS501a转化率为270 CFU/μg/DNA.根据影响转化效率的因素,推测在该方法中,枯草芽孢杆菌质粒转化原理:一定生物量的枯草芽孢杆菌在外界营养条件和钙、镁离子作用下,细胞壁和细胞膜形成缺陷,使外源DNA转入枯草芽孢杆菌细胞内.
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| 关 键 词： | 枯草芽孢杆菌 感受态细胞 质粒转化方法 |
Competent Preparation and Plasmid Transformation of Bacillus subtilis |
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| Li Ruifang,Xue Wenwen,Huang Liang,Xiong Qiancheng,Wang Bin. Competent Preparation and Plasmid Transformation of Bacillus subtilis[J]. Biotechnology Bulletin, 2011, 0(5) |
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| Authors: | Li Ruifang Xue Wenwen Huang Liang Xiong Qiancheng Wang Bin |
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