CP4-EPSPS转基因蛋白的适体筛选与亲和性分析北大核心CSCD |
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引用本文: | 江树勋,郎春燕,邵碧英,陈洪俊,陈文炳,潘大仁.CP4-EPSPS转基因蛋白的适体筛选与亲和性分析北大核心CSCD[J].生物技术,2011(6):53-57. |
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作者姓名: | 江树勋 郎春燕 邵碧英 陈洪俊 陈文炳 潘大仁 |
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作者单位: | 1.福建省检验检疫技术研究重点实验室福建农林大学生命科学学院350003;2.中国检验检疫科学研究院100025; |
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基金项目: | 科技部转基因生物新品种培育重大专项("转基因产品检测新技术研究";2009ZX08012-001B)资助 |
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摘 要: | 目的:通过筛选获得CP4-EPSPS转基因蛋白的最优适体,为应用于检测作准备。方法:体外合成长度为78个碱基的随机ssDNA文库,应用指数富集配基的系统进化(SELEX)技术,以CP4-EPSPS转基因蛋白为靶目标进行15轮筛选,将筛选到的适体群进行克隆、测序,用DNAMAN软件对每个适体的保守序列和二级结构进行分析并应用生物素-抗地高辛碱性磷酸酶显色系统进行亲和性分析。结果:成功获得靶目标的最优适体,即D04号适体,结合率最高(2.2745)为最低的5.9倍。结论:筛选流程合理、可行,实验结果较理想。
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关 键 词: | CP4-EPSPS转基因蛋白 SELEX 适体 诱变PCR 亲和性 |
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