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白血病耐药细胞系U937/ADR的建立及其生物学性状
引用本文:薛芳,成志勇,杨琳,李世辉,张颖,潘岐. 白血病耐药细胞系U937/ADR的建立及其生物学性状[J]. 中国生物工程杂志, 2009, 29(7): 17-21
作者姓名:薛芳  成志勇  杨琳  李世辉  张颖  潘岐
作者单位:1. 河北医科大学第二医院 河北省血液病重点实验室2. 保定市第一医院3. 北京航空工业中心医院
摘    要:目的:建立白血病耐药细胞系U937/ADR模型,并检测其多药耐药相关基因及其生物学性状的改变。方法:以大剂量阿霉素(IC50浓度),短时间(2h)暴露法诱导人白血病细胞系U937细胞的阿霉素耐药性。检测细胞的生长曲线,计算阿霉素耐药倍数,流式细胞术分析细胞周期分布;罗丹明123检测药物外排功能;荧光定量PCR(FQ-PCR)检测MDR1、MRP1、NF-Κb、Bcl-2、Bax mRNA水平变化;Western blot 检测Akt、p-Akt、P65、P-gp、MRP1和Bcl-2蛋白水平变化。结果:成功构建耐阿霉素U937/ADR细胞系,对阿霉素耐药指数为亲代U937细胞的11倍,U937/ADR群体倍增时间为43.6h,高于亲代细胞8.9h;流式细胞分析显示与U937细胞相比,U937/ADR的G0/G1期细胞增多,而G2/M期细胞减少。并对多种化疗药物产生交叉耐药性。罗丹明123外排试验显示,U937/ADR细胞外排明显增加。U937/ADR细胞MDR1、NF-Κb、Bcl-2 mRNA表达水平明显增加,P-gp及p-Akt、P65表达水平增加。结论:成功构建的U937/ADR细胞系其生物学特性明显不同与亲代U937细胞,对多种化疗药物产生多药耐药,高表达多药耐药蛋白P-gp,同时激活p-Akt及NF-Kb。

关 键 词:U937;多药耐药;阿霉素;P糖蛋白;转录因子  
收稿时间:2008-11-19
修稿时间:2009-01-17

Establishment of an Adriamycin Resistant Human Leukemia Cell Line U937/ADR and Its Biological Characterizations
XUE Fang,CHENG Zhi-yong,YANG Lin,LI Shi-hui,ZHANG Ying,PAN Ling. Establishment of an Adriamycin Resistant Human Leukemia Cell Line U937/ADR and Its Biological Characterizations[J]. China Biotechnology, 2009, 29(7): 17-21
Authors:XUE Fang  CHENG Zhi-yong  YANG Lin  LI Shi-hui  ZHANG Ying  PAN Ling
Affiliation:1 Department of Hematology, the Second Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang050000, China2 Department of Hematology, the First Hospital of Baoding, Baoding071000, China3 Department of Oncology, the Center Hospital of Aviation lndustry of Beijing| Beijing100012|China
Abstract:
Keywords:U937
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