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一种可用于SiRNA转染的可降解的新型脂质聚合物
引用本文:陈舜,季守平,靳小攀,赵刚,俞磊. 一种可用于SiRNA转染的可降解的新型脂质聚合物[J]. 生物技术通报, 2008, 0(Z1)
作者姓名:陈舜  季守平  靳小攀  赵刚  俞磊
作者单位:1. 平阳县海洋与渔业局,325000;军事医学科学院野战输血研究所,北京,100850
2. 平阳县海洋与渔业局,325000;军事医学科学院野战输血研究所,北京,100850;Nitro Denko Technical Corporation,501 Via Del Monte,Oeeanside,CA 92010
3. Nitro Denko Technical Corporation,501 Via Del Monte,Oeeanside,CA 92010
摘    要:合成一种兼具阳离子脂质体和阳离子聚合物优点的可用于SiRNA的新型脂质聚合物载体.以低分子量的支链聚乙烯亚胺(BPEI,分子量600D)为基础,通过交联剂将油酸与之交联,形成PEI-交联剂-油酸为单元的高分子脂质聚合物.以稳定表达EGFP基因的HeLa-EGFP细胞为模型,比较脂质聚合物、高分子聚合物BPEI(MW 25KD)及阳离子脂质体Lipofectamine 2000介导的SiRNA转染效率,以MTT法检测转染后细胞毒性.将聚合物放置于中性环境37℃保温,检测在温育不同时间后结合FITC标记的寡核苷酸能力.脂质聚合物介导转染EGFP-SiRNA的细胞中,绿色荧光蛋白的信号下降了72.3%,下降幅度高于Lipofectamine 2000介导转粢的细胞,而BPEI介导的转染细胞中的荧光强度仅比空白对照下降20%左右.MTT结果显示在最适条件下,脂质聚合物的介导的SiRNA转染48h后,细胞存活率为94.87%,高于BPEI 25K和Lipofectamine 2000对照组(80.68%和64.87%).降解实验证实,脂质聚合物和BPEI25K相似,在与FITC标记的寡核苷酸结合后,使其荧光水平下降65%左右;在保温后,脂质聚合物对荧光的抑制能力逐步下降,在8h后其荧光强度与BPEI600对照组相似;BPEI 25K实验组在保温前后荧光强度无显著的变化.脂质聚合物是一种可降解的化合物,具有与Lipofectamine 2000相似的SiRNA转染效率,细胞毒性明显低于BPEI和Lipofectamine 2000.提示脂质聚合物兼具阳离子脂质体和阳离子聚合物的优点.

关 键 词:脂质聚合物  可降解性  转染效率  细胞毒性

A New Degradable Lipid-Polymer Gene Carrier and Its Application in SiRNA Transfection
Shen Shun,Ji Shouping,Jin Xiaopan,Zhao Gang,Yu Lei. A New Degradable Lipid-Polymer Gene Carrier and Its Application in SiRNA Transfection[J]. Biotechnology Bulletin, 2008, 0(Z1)
Authors:Shen Shun  Ji Shouping  Jin Xiaopan  Zhao Gang  Yu Lei
Abstract:
Keywords:SiRNA
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