摘 要: | 为解决实验室中包装慢病毒转染效率低、感染效率低的问题,从培养液p H角度对病毒包装及感染进行优化。首先构建慢病毒载体cop GFP质粒,采用磷酸钙法和Lipofectamine2000法,转染不同p H培养液培养的293T细胞。在荧光显微镜下比较转染效率,发现磷酸钙法p H(6.5~7.5)转染效率高,培养液p H(6~8)对Lipofectamine2000法转染几乎无影响。使用标准p H(7.2~7.4)培养液包装慢病毒,收取病毒上清液后调节至不同p H,加或不加Polybrene感染293T细胞,发现p H在8~9附近感染效率高,调节慢病毒p H至弱碱性与Polybrene同时使用有助于提高感染效率。
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