分子生物学技术讲座（三）——真核细胞mRNA的提取,纯化,分析及cDNA文库的构建

哺乳动物平均每个细胞含有10-5μgRNA，理论上认为每克细胞可分离出5～10mgRNA。其中rRNA为80％～85％，tRNA占10％～16％，而mRNA仅占1％～5％，并且rnRNA分子种类繁多，分子量大小不均一，但绝大多数mRNA分子均在3’端存在ZO～250个多聚腺着酸P0ly（A），所以利用其此特性，用寡聚（dT）亲和层析柱，很容易从总的RNA中纯化mR－NA分子。mRNA的分析通常采用甲醛变性胶电泳法和其它变性胶电泳法进行，或进一步用Northern印迹法和放射性探针杂交反应进行分析。N0rthern印迹法是指将RNA变性电泳后，转移至固相支持物上的过程。…