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小麦苗期地下茎蛋白质双向电泳技术体系的优化
引用本文:王晓楠,付连双,李卓夫,李文滨,孙艳丽,王金伟,刘灿,陈禹兴.小麦苗期地下茎蛋白质双向电泳技术体系的优化[J].中国生物工程杂志,2008,28(12).
作者姓名:王晓楠  付连双  李卓夫  李文滨  孙艳丽  王金伟  刘灿  陈禹兴
摘    要:以东农冬麦1号为材料,对苗期地下茎处的蛋白提取方法、蛋白溶解、上样量、胶条的转移等方面进行了试验.结果表明:在蛋白提取方面,TCA/丙酮法(T法)和尿素/硫脲法(N法)相比T法能减少低丰度蛋白的损失得到蛋白点数更多的图谱.在蛋白溶解方面,经过两次水化液溶解的蛋纯度较高,在等电聚焦时能保持8000伏较高电压.上样量方面,10mg粗蛋白溶于两次水化液能得到清晰、分离效果好、蛋白点数较多的图像.胶条转移方面,先向胶面中加入400μl0.3%普通琼脂糖溶液后,用200μl的电极缓冲液冲洗胶条支撑膜会使胶条顺利转移到第二向胶面上且胶条与胶面间不会产生气泡.

关 键 词:双向电泳  蛋白提取  蛋白溶解  上样量  胶条的转移

Optimization of Two Dimensional Electrophoresis System of Proteins in the Seedling Rhizom in Wheat
WANG Xiao-nan,FU Lian-shuang,LI Zhuo-fu,LI Wen-bin,SUN Yan-li,WANG Jin-wei,LIU Can,CHEN Yu-xing.Optimization of Two Dimensional Electrophoresis System of Proteins in the Seedling Rhizom in Wheat[J].China Biotechnology,2008,28(12).
Authors:WANG Xiao-nan  FU Lian-shuang  LI Zhuo-fu  LI Wen-bin  SUN Yan-li  WANG Jin-wei  LIU Can  CHEN Yu-xing
Abstract:
Keywords:
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