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牛流行热病毒LUX~(TM)荧光RT-PCR检测方法的建立
引用本文:刘志玲,陈茹,邱索平,马静云,曾碧健,周科. 牛流行热病毒LUX~(TM)荧光RT-PCR检测方法的建立[J]. 生物技术通报, 2010, 0(8)
作者姓名:刘志玲  陈茹  邱索平  马静云  曾碧健  周科
作者单位:1. 广东出入境检验检疫局,广州,510623;华南农业大学动物科学院,广州,510642
2. 广东出入境检验检疫局,广州,510623
3. 华南农业大学动物科学院,广州,510642
基金项目:国家质检总局科研项目 
摘    要:采用LUXTM荧光PCR技术原理,以牛流行热病毒(BEFV)糖蛋白抗原G基因保守序列为模板设计特异荧光PCR扩增引物,建立BEFV LUXTM实时荧光RT-PCR快速检测方法。试验结果显示,所建立的荧光RT-PCR可特异检测牛流行热病毒RNA,而对蓝舌病病毒、牛病毒性腹泻-粘膜病病毒、水泡性口炎病毒、口蹄疫病毒、牛白血病病毒以及与BEFV同种属的狂犬病病毒核酸检测呈阴性反应。敏感性试验表明LUXTM荧光RT-PCR对BEFV RNA的检测敏感性比常规RT-PCR方法提高达100倍以上。该LUXTM荧光RT-PCR的批内检测变异系数0.64%-1.17%,批间检测变异系数均小于2%,表明检测体系稳定、重复性好。通过人工添加灭活病毒液的方法制备30份模拟感染牛血清样品,采用上述所建立的BEFV LUXTM荧光RT-PCR方法检测均呈阳性。

关 键 词:牛流行热病毒  荧光引物  实时荧光RT-PCR

Establishment of LUXTM Real-time Assaies for Rapid Detection of Bovine Ephemeral Fever Virus
Liu Zhiling,Chen Ru,Qiu Suoping,Ma Jingyun,Zeng Bijian,Zhou Ke. Establishment of LUXTM Real-time Assaies for Rapid Detection of Bovine Ephemeral Fever Virus[J]. Biotechnology Bulletin, 2010, 0(8)
Authors:Liu Zhiling  Chen Ru  Qiu Suoping  Ma Jingyun  Zeng Bijian  Zhou Ke
Abstract:
Keywords:LUXTM
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