| 鸭肠炎病毒核衣壳蛋白基因的克隆与原核表达 |
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| 引用本文： | 代淑燕,寨鸿瑞,文明,刘忠伟,周碧君.鸭肠炎病毒核衣壳蛋白基因的克隆与原核表达[J].生物技术,2008,18(4). |
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| 作者姓名： | 代淑燕 寨鸿瑞 文明 刘忠伟 周碧君 |
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| 作者单位： | 1. 贵州大学动物科学学院,贵州,贵阳,550025
2. 贵州大学动物科学学院,贵州,贵阳,550025;贵州大学动物疫病研究所,贵州,贵阳,550025 |
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| 摘 要： | 目的：对DEV贵州分离株NP基因进行克隆与序列分析，构建NP基因的原核表达载体，分析NP基因原核表达产物的免疫反应性。方法：根据GeneBank登载的DENNP基因序列设计引物，对DEV贵州分离株进行PCR扩增、克隆和测序，采用生物信息学软件程序分析NP蛋白的氨基酸序列；将该基因插入到原核表达载体pET32a上进行原核表达和Western Blotting分析。结果：DEV贵州分离株NP基因全长759bp，核苷酸序列与参考株一致；NP基因编码蛋白相对分子量为27．1kDa，理论pI为5．89，肽链上第10．15、88．92和182．186区段及其附近区域可能是B细胞表位优势区；构建得到的重组质粒pET32-NP可表达出一条大小约为48kDa的蛋白，且能与兔抗DEN-IgG发生特异性结合。结论：NP基因在DEN基因组中高度保守，其原核表达产物具有良好的免疫反应性。
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| 关 键 词： | 鸭肠炎病毒 核衣壳蛋白基因 序列分析 原核表达 |
Cloning and Prokaryotic Expression of Nucleocapsid Protein Gene of Duck Enteritis Virus |
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| DAI Shu-yan,ZHAI Hong-rui,WEN Ming,LIU Zhong-wei,ZHOU Bi-jun.Cloning and Prokaryotic Expression of Nucleocapsid Protein Gene of Duck Enteritis Virus[J].Biotechnology,2008,18(4). |
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| Authors: | DAI Shu-yan ZHAI Hong-rui WEN Ming LIU Zhong-wei ZHOU Bi-jun |
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