重组人α降钙素基因相关肽的克隆与表达

通过PCR方法从人类基因组中扩增出编码hαCGRP的片段，将该片段定向克隆到pET-32a( )载体上，构建DET-hαCGRP重组质粒．转化E．coli JM109菌株，利用酶切和测序方法筛选后，经IPTG诱导再转化E.coli BL21trxB(DE3)pLysS菌株.SDS-PAGE和Western Blot分析表达产物，最后通过扩张蟾蜍肠系膜微循环血管实验来检测重组hαCGRP扩张血管的活性，结果表明，重组质粒含hαCGRP成熟肽编码基因序列(111bp)，符合预想结果；表达出21kD的融合蛋白,且主要以可溶性形式存在，其粗提物具有扩张血管能力,重组hαCGRP的成功表达为下一步纯化及研制基因工程药物奠定了重要基础。