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青花菜雄性不育相关基因BoDHAR的克隆与表达分析
引用本文:张国裕,康俊根,张延国,程智慧,王晓武. 青花菜雄性不育相关基因BoDHAR的克隆与表达分析[J]. 生物工程学报, 2006, 22(5): 751-756
作者姓名:张国裕  康俊根  张延国  程智慧  王晓武
作者单位:1. 中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京,100081;西北农林科技大学园艺学院,杨凌,712100
2. 中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京,100081
3. 西北农林科技大学园艺学院,杨凌,712100
基金项目:国家自然科学基金;农业部重点实验室基金
摘    要:以一个与甘蓝显性核不育相关的差异表达片段的序列为信息探针,通过在NCBI与TAIR网站数据库中进行同源EST序列搜索,经人工拼接、RT-PCR、PCR克隆与序列分析,获得了青花菜脱氢抗坏血酸还原酶DHARdehydroascorbatereductase基因的cDNA与DNA全长序列,命名为BoDHAR。并利用双链接头介导PCR的染色体步行技术(genomewalking)克隆了其上游644bp的5′端序列。所获的BoDHAR基因全长1486bp,存在两个内含子,DNA编码区序列633bp,编码210个氨基酸;序列分析表明BoDHAR与同源基因AT1G19570.1cDNA序列有82.3%的一致性,推导的氨基酸序列有79.6%的一致性;编码的水溶性蛋白存在多个磷酸化位点;5′端上游区存在明显的转录调控序列。半定量RT-PCR结果表明BoDHAR在可育系花蕾中的表达量明显高于不育系花蕾,在花药中的表达明显高于其它部位。

关 键 词:青花菜(Brassica oleracea L.var.italica)  DHAR(dehydroascorbate reductase)  基因克隆  RT-PCR
文章编号:1000-3061(2006)05-0751-06
收稿时间:2006-02-13
修稿时间:2006-04-05

Gene Cloning and Expression Analysis of a Male Sterility Related Gene BoDHAR from Broccoli
ZHANG Guo-Yu,KANG Jun-Gen,ZHANG Yan-Guo,CHENG Zhi-Hui,WANG Xiao-Wu. Gene Cloning and Expression Analysis of a Male Sterility Related Gene BoDHAR from Broccoli[J]. Chinese journal of biotechnology, 2006, 22(5): 751-756
Authors:ZHANG Guo-Yu  KANG Jun-Gen  ZHANG Yan-Guo  CHENG Zhi-Hui  WANG Xiao-Wu
Affiliation:1. Institute of Vegetables and Flowers, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China; 2 .College of Horticulture, North- West Sci- Tech University of Agricultural and Forestry, Yangling 712100, China
Abstract:
Keywords:Broccoli (Brassica oleracea L. var. italica)  DHAR (Dehydroascorbate Reductase)  gene cloning  RT-PCR
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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