| 基于启动子和宿主改造的酿酒酵母表达系统优化研究 |
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| 引用本文： | 张旭,王晶晶,刘建平. 基于启动子和宿主改造的酿酒酵母表达系统优化研究[J]. 中国生物工程杂志, 2015, 35(1): 61-66. DOI: 10.13523/j.cb.20150109 |
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| 作者姓名： | 张旭 王晶晶 刘建平 |
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| 作者单位： | 复旦大学生命科学学院 遗传工程国家重点实验室 上海 200433 |
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| 基金项目： | 国家"863" 计划资助项目(2007AA02Z107) |
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| 摘 要： | 生物医药领域中一套高效表达系统对于重组蛋白的生产至关重要。酿酒酵母作为一种食品级真核微生物,具有繁殖迅速、培养简单、遗传操作便捷等特点,是生产重组蛋白较理想的表达系统之一。对实验室已有的p HR酿酒酵母表达系统进行优化。分别通过易错PCR技术和菌株诱变技术对酿酒酵母启动子PTEF和宿主酿酒酵母Y16进行突变改造,经筛选、鉴定获得表达性能提高的启动子PTEFV1和酿酒酵母Y16-E14、Y16-E19。随后,利用启动子PTEFV1构建以Y16-E14为宿主的p HR-N酿酒酵母表达系统,以绿色荧光蛋白和人血清白蛋白为对象,比较表达系统改造前后性能变化。结果显示p HR-N酿酒酵母表达系统无论胞内表达绿色荧光蛋白还是分泌表达人血清白蛋白的能力均较改造前明显提高。p HR-N系统为获得更多具有重要应用价值的重组蛋白提供了有利的工具。
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| 关 键 词： | 酿酒酵母 表达系统 启动子 宿主 优化改造 |
| 收稿时间： | 2014-10-21 |
The Optimization of Saccharomyces cerevisiae Expression System by Mutagenesis of Promoter and Host Strain |
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| ZHANG Xu,WANG Jing-jing,LIU Jian-ping. The Optimization of Saccharomyces cerevisiae Expression System by Mutagenesis of Promoter and Host Strain[J]. China Biotechnology, 2015, 35(1): 61-66. DOI: 10.13523/j.cb.20150109 |
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| Authors: | ZHANG Xu WANG Jing-jing LIU Jian-ping |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Saccharomyces cerevisiae Expression system Promoter Host strain optimization |
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