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| 一个光合组织特异表达强启动子的分离及功能分析 | |
| 作者姓名： | 杨予涛 杨国栋 刘石娟 郭兴启 郑成超 |
| 作者单位： | 山东农业大学生命科学学院,泰安,271018 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(批准号:30270145)，国家“863”计划(批准号:2002AA224101)，国家转基因植物研究与产业化专项(批准号:J99-A-038)资助项目 |
| 摘 要： | 用接头PCR技术克隆了长度为1415 bp的PNZIP基因启动子, 该启动子具有真核生物启动子的典型特征, 引物延伸实验证明转录起始位点位于翻译起始位点上游122 bp处. 根据PNZIP基因启动子的序列特征, 利用PCR技术对该启动子进行了有目的的缺失, 将5个长度不同的启动子片段分别与报告基因GUS相连接, 构建植物表达载体, 转化烟草. 荧光定量检测结果表明: 5个不同长度的PNZIP启动子均能驱动GUS基因在光合组织中专一表达, 它们的活性随着启动子5′端的逐步缺失而不断地下降; 在叶片组织中长度为1415 bp的PNZIP启动子活性比35S启动子高9倍; PNZIP启动子中存在2个可能与光合组织特异表达有关的新的顺式作用元件, 即GAAATA和GATACT, GATACT元件可能决定基因的光合组织特异性表达, 而GAAATA可能作为增强子提高基因在光合组织的表达强度. |
| 关 键 词： | 缺失分析 转基因烟草 GUS 组织特异表达 强启动子 |
| 收稿时间： | 2002-08-13 |
| 修稿时间： | 2002-08-13 |
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