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刺芹侧耳芳基醇氧化酶的分离纯化及其酶学性质
引用本文:吴茵,陈敏,郭倩.刺芹侧耳芳基醇氧化酶的分离纯化及其酶学性质[J].菌物学报,2016(6):705-713.
作者姓名:吴茵  陈敏  郭倩
作者单位:浙江工商大学食品与生物工程学院 浙江杭州310018
基金项目:浙江省科技厅专项(2014C33027)Supported by Special Project of Science Technology Department of Zhejiang Province (2014C33027).
摘    要:分离纯化刺芹侧耳Pleurotus eryngii芳基醇氧化酶,并探究其酶学性质。通过硫酸铵盐沉、DEAE-Sepharose Fast Flow弱阴离子交换层析、Sephacryl S-200 High Resolution凝胶过滤层析和Source 15Q强阴离子交换层析,得到纯化的单一酶。经肽指纹图谱鉴定,确定其为芳基醇氧化酶,酶活回收率25.5%,纯化倍数38.2。结合SDS-PAGE和IEF-PAGE分析,确定其分子量和等电点分别为70k Da和4.2。以藜芦醇为底物,该酶最适反应p H为6.0,最适反应温度为70℃,金属离子Zn~(2+)、Fe~(2+)和Cu~(2+)对芳基醇氧化酶的活性抑制作用明显,Km和Vmax分别为0.921mmol/L和80U/mg。

关 键 词:刺芹侧耳  芳基醇氧化酶  柱层析  藜芦醇

Purification and characterization of aryl-alcohol oxidase from Pleurotus eryngii
Abstract:
Keywords:Pleurotus eryngii  aryl-alcohol oxidase  column chromatography  veratryl alcohol
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