| 人Tim-3 基因真核表达载体的构建及表达 |
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| 引用本文： | 刘津麟 刘东升 李冬宏 周南进 谢勇. 人Tim-3 基因真核表达载体的构建及表达[J]. 现代生物医学进展, 2011, 11(18): 3427-3430 |
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| 作者姓名： | 刘津麟 刘东升 李冬宏 周南进 谢勇 |
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| 作者单位： | 1. 南昌大学医学科学研究所 江西南昌330006
2. 南昌大学第一附属医院消化研究所 江西南昌330006 |
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| 摘 要： | 目的:为了构建可在真核细胞中高效表达人Tim-3(hTim-3)的真核表达质粒,以便用于hTim-3肿瘤免疫治疗研究。方法:取健康人外周血的单个核细胞,用高保真聚合酶扩增hTim-3基因,先进行hTim-3基因的亚克隆,用BglⅡ和SalⅠ限制性内切酶切下带有酶切位点的hTim-3基因,最终构建hTim-3基因的真核表达质粒pEGFP-N1-hTim-3。用脂质体方法转染质粒至肝癌细胞SMMC7721和巨噬细胞U937中。48h后荧光显微镜观察转染细胞绿色荧光表达情况,初步判断转染效率。结果:酶切和测序鉴定证实目的基因hTim-3正确插入到真核表达载体pEGFP-N1中,转染肝癌细胞SMMC7721和巨噬细胞U937后,在荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白的表达。结论:成功构建了可在真核细胞中高效表达hTim-3基因的真核表达质粒pEGFP-N1-hTim-3,为进一步研究hTim-3的肿瘤免疫治疗奠定了基础。
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| 关 键 词： | Tim-3基因 克隆 表达 |
Construction of Eukaryotic Expression Vector of Human TIM-3 Gene |
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| LIU Jin-lin,LIU Dong-sheng,LI Dong-hong,ZHOU Nan-Jin,XIE Yong. Construction of Eukaryotic Expression Vector of Human TIM-3 Gene[J]. Progress in Modern Biomedicine, 2011, 11(18): 3427-3430 |
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| Authors: | LIU Jin-lin LIU Dong-sheng LI Dong-hong ZHOU Nan-Jin XIE Yong |
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| Affiliation: | LIU Jin-lin1,LIU Dong-sheng2,LI Dong-hong1,ZHOU Nan-Jin1,XIE Yong2(1 The Medical Institute of Nanchang University,Nanchang 330006,2 Institute of Gastroenterology,The First Affiliated Hospital of Nanchang University,Jiangxi Province,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Tim-3 gene Clone Expression |
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