| 溶氧反馈分批补料高密度培养人骨形成蛋白-2工程菌 |
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| 引用本文： | 李毅 蒲勤 赵忠良 柴玉波 陈南春 陈苏民. 溶氧反馈分批补料高密度培养人骨形成蛋白-2工程菌[J]. 生物工程学报, 2002, 18(6): 718-723 |
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| 作者姓名： | 李毅 蒲勤 赵忠良 柴玉波 陈南春 陈苏民 |
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| 作者单位： | 中国人民解放军第四军医大学生物化学与分子生物学教研室，中国人民解放军第四军医大学生物化学与分子生物学教研室，中国人民解放军第四军医大学生物化学与分子生物学教研室，中国人民解放军第四军医大学生物化学与分子生物学教研室，中国人民解放军第四军医大学生物化学与分子生 |
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| 基金项目： | 全军医药卫生科研基金重点课题 (No .912 0 0 4,9130 10 ,96z0 45 )，国家重点科技攻关项目 (No .85 72 2 0 1 0 8)~~ |
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| 摘 要： | 对表达人骨形成蛋白－2成熟肽的基因工程大肠杆菌E.coli DH5α/pDH-B2m在500mL摇瓶中进行了培养条件的摸索实验，并在此基础上扩大至NBS Bioflo IV20L发酵罐，利用溶氧反馈－分批补料培养技术：在培养过程中保持适当的溶解氧（40％），以溶氧值在线反馈控制搅拌速度及流加补料培养基，使细菌保持适当的比生长率，成功地进行了工程菌的高密度培养，最终菌体密度达OD600＝57，每升干菌量22.8g，目的蛋白的表达量占细菌总蛋白的30％，人骨形成蛋白－2成熟肽的理论产率达到3.59g/L。
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| 关 键 词： | 溶氧反馈－分批补料 高密度培养 人骨形成蛋白－2 工程菌 |
| 文章编号： | 1000-3061(2002)06-0718-06 |
| 修稿时间： | 2002-06-10 |
High density fed-batch culture of Escherichia coli DH5 alpha/pDH-B2m with DO feed-back control of nutrient feeding] |
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| LI Yi PU Qin ZHAO Zhong-Liang CHAI Yu-Bo CHEN Nan-Chun CHEN Su-Min. High density fed-batch culture of Escherichia coli DH5 alpha/pDH-B2m with DO feed-back control of nutrient feeding][J]. Chinese journal of biotechnology, 2002, 18(6): 718-723 |
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| Authors: | LI Yi PU Qin ZHAO Zhong-Liang CHAI Yu-Bo CHEN Nan-Chun CHEN Su-Min |
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| Affiliation: | Department of Biochemistry and Molecular Biology, Forth Military Medical University, Xi'an 710032, China. |
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| Abstract: | Optimization of cultivation condition of recombinant E. coli DH5 alpha/pDH-B2m and the condition suitable for expression of recombinant mature peptide of human bone morphogenetic protein-2 was carried out in 500 mL shaking flasks and then transferred to NBS Bioflo IV, a 20 L DO feed-back fed-batch culture system, to obtain rhBMP-2. The results indicate that keeping dissolved oxygen at 40% and controlling nutrient feeding rate with DO feed back strategy can obtain theoretically 3.59 g recombinant mature peptide of hBMP-2 per liter of broth, the final cell density OD600 reaches 57(22.8 g dry cell weight/L), and the expression of rhBMP-2 amounts to 30% of the total protein in E. coli. |
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| Keywords: | human bone morphogenetic protein-2 recombinant E.coli fed-batch high density cultivation |
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