红曲霉葡萄糖淀粉酶的紫外差光谱的研究

红曲霉葡萄糖淀粉酶(EC3 2．1．3)在凝胶电泳上呈现3--5个极为接近均具有酶活性的区带，测定了其中主要的两个分子型E，和E．的紫外吸收特性，它们在水，pH5．0酷酸缓冲液，pH7．0柠檬酸缓冲液中吸收光谱十分接近，吸收峰均在Z80am。 E，在水溶液中280am时8=11．3 x104，A==20．4，E．在水溶液中280rim时8=11．0×104Ai==20．0，E3和E4在0.1NNaOH中吸收均增强且峰位红移，在0.1N HCI中吸收峰略为蓝移。测定了E，和E．在pH 3．1和pH 3．6时的温度差光谱，在pH 3.1 E，和E. AA变化极小，在pH 3.6，E，比E．△A变化大，但转变温度E，和E．都在56℃左右。E，和E．酪氨酸光谱滴定行为极为接近，其pK值在11．5左右。测定了E，pH差光谱和变性差光谱，以pH 2．66为参比溶液，在pH 3.55、4.65、7.14及7．84可以见到酪氨酸和色氨酸的差吸收峰。8M尿素和6M盐酸胍均能使E，出现酪氨酸和色氢酸的负的差吸收峰。