| A型肉毒毒素表位多肽免疫和人源噬茵体单链抗体文库的构建 |
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| 引用本文： | 王慧,荫俊,侯晓军,邢洪光. A型肉毒毒素表位多肽免疫和人源噬茵体单链抗体文库的构建[J]. 生物技术通讯, 2004, 15(5): 441-443 |
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| 作者姓名： | 王慧 荫俊 侯晓军 邢洪光 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院,微生物流行病研究所,北京,100071 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划(“973”计划)(2002CB513205)，总后“十五”指令性课题(IL033) |
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| 摘 要： | 采用表位合成多肽免疫获得编码人源抗体的基因材料，抗体轻重链可变区基因通过剪接重叠延伸(SOE)技术进行组装后，亚克隆入噬菌体粒中构建免疫库。以重组制备的A型肉毒毒素保护性抗原为配体筛选结合子，ELISA鉴定，获得具有较高抗原结合力的噬菌体克隆，进行基因测序和家族定位分析。结果显示，表位合成多肽免疫，成功构建了库容大于10^8的重组抗体库。体外3轮免疫淘筛，筛选到人源A型肉毒抗毒素克隆，基因结构分析表明，其中ScFvB17全长750bp，可编码250个氨基酸残基：VH属于VH4家族，369bp，编码123个氨基酸残基；Vκ属于κ链Ⅱ家族，336bp，编码112个氨基酸残基。基因的同源分析表明，这是一株特异的单链抗体新基因。
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| 关 键 词： | 表位 免疫 A型肉毒毒素 单链抗体 噬菌体 合成多肽 基因 文库 剪接 克隆 |
| 文章编号： | 1009-0002(2004)05-0441-03 |
| 修稿时间： | 2004-04-14 |
Construction of human phage ScFv immunized library by epitope peptides of botulinum neurotoxin serotype A |
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| WANG Hui,YIN Jun,HOU Xiao-jun,XING Hong-guangInstitute of Microbiology and Epidemiology,Academy of Military Medical Sciences,Beijing ,China. Construction of human phage ScFv immunized library by epitope peptides of botulinum neurotoxin serotype A[J]. Letters in Biotechnology, 2004, 15(5): 441-443 |
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| Authors: | WANG Hui YIN Jun HOU Xiao-jun XING Hong-guangInstitute of Microbiology Epidemiology Academy of Military Medical Sciences Beijing China |
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| Affiliation: | WANG Hui,YIN Jun,HOU Xiao-jun,XING Hong-guangInstitute of Microbiology and Epidemiology,Academy of Military Medical Sciences,Beijing 100071,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | botulinum neurotoxin serotype A epitope peptides human phage antibody library ScFv |
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