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优化培养条件和裂解方法提高hRANKL在大肠杆菌内的表达
引用本文:车路阳,郭志兰,郭清华,潘冰,李晶哲,刘长振,黄鹏. 优化培养条件和裂解方法提高hRANKL在大肠杆菌内的表达[J]. 生物工程学报, 2017, 33(5): 849-862
作者姓名:车路阳  郭志兰  郭清华  潘冰  李晶哲  刘长振  黄鹏
作者单位:1 中国人民解放军总医院骨科,北京 100853; 2 中国中医科学院医学实验中心 中医药防治重大疾病基础研究北京市重点实验室,北京 100700,2 中国中医科学院医学实验中心 中医药防治重大疾病基础研究北京市重点实验室,北京 100700,1 中国人民解放军总医院骨科,北京 100853,3 北京济全生物科技有限责任公司,北京 100070,2 中国中医科学院医学实验中心 中医药防治重大疾病基础研究北京市重点实验室,北京 100700,2 中国中医科学院医学实验中心 中医药防治重大疾病基础研究北京市重点实验室,北京 100700,1 中国人民解放军总医院骨科,北京 100853
基金项目:国家自然科学基金 (Nos. 31170829, 81171762, 81550017),北京市科技新星计划 (No. 2007B059) 资助。
摘    要:RANKL/RANK/OPG轴在骨代谢过程中起到中心调节作用,也是近年来骨相关疾病治疗研究的热点之一。RANKL蛋白在RANKL/RANK/OPG轴信号传递过程中起到关键作用,在骨代谢相关实验研究中用途广泛。但是,使用大肠杆菌Escherichia coli可溶表达重组人源RANKL蛋白 (hRANKL) 时产量远低于鼠源RANKL (mRANKL)。本研究通过将LB培养基pH值调整并稳定在7.5、降低诱导表达温度至16 ℃并优化细菌裂解条件,成功地将可溶hRANKL产量增加到了对照组的5?12倍。该方法有效提高了hRANKL在大肠杆菌中可溶表达的产量,同时也是研究重组蛋白在大肠杆菌内的可溶表达策略的有益尝试。

关 键 词:RANKL,大肠杆菌,蛋白表达,骨质疏松
收稿时间:2016-12-01

Enhancing hRANKL production in Escherichia coli by optimizing culture conditions and lysing program
Luyang Che,Zhilan Guo,Qinghua Guo,Bing Pan,Jingzhe Li,Changzhen Liu and Peng Huang. Enhancing hRANKL production in Escherichia coli by optimizing culture conditions and lysing program[J]. Chinese journal of biotechnology, 2017, 33(5): 849-862
Authors:Luyang Che  Zhilan Guo  Qinghua Guo  Bing Pan  Jingzhe Li  Changzhen Liu  Peng Huang
Abstract:
Keywords:RANKL   Escherichia coli   protein expression   osteoporosis
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