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鸭疫里默氏杆菌Mtan对底物SAH的催化活性
引用本文:吴小卡,徐达,荆雅玮,吕小龙,胡剑刚,米荣升,黄燕,王成明,陈兆国,韩先干.鸭疫里默氏杆菌Mtan对底物SAH的催化活性[J].微生物学通报,2017,44(5):1165-1170.
作者姓名:吴小卡  徐达  荆雅玮  吕小龙  胡剑刚  米荣升  黄燕  王成明  陈兆国  韩先干
作者单位:1. 中国农业科学院上海兽医研究所 上海 200241,1. 中国农业科学院上海兽医研究所 上海 200241;2. 扬州大学兽医学院 江苏 扬州 225009,1. 中国农业科学院上海兽医研究所 上海 200241,1. 中国农业科学院上海兽医研究所 上海 200241,1. 中国农业科学院上海兽医研究所 上海 200241,1. 中国农业科学院上海兽医研究所 上海 200241,1. 中国农业科学院上海兽医研究所 上海 200241,1. 中国农业科学院上海兽医研究所 上海 200241;2. 扬州大学兽医学院 江苏 扬州 225009,1. 中国农业科学院上海兽医研究所 上海 200241,1. 中国农业科学院上海兽医研究所 上海 200241
基金项目:国家自然科学基金项目(No. 31572546,31370045);上海市科技兴农重点攻关项目(No. G20150109)
摘    要:【目的】分析鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)不同血清型pfs基因的序列差异,并开展其编码蛋白S-腺苷高半胱氨酸核苷酶(Mtan,又称Pfs)的催化活性研究。【方法】PCR扩增9株不同血清型RA的pfs基因,分析其核苷酸序列的同源性;构建该基因的重组表达载体p Cold-RA-pfs,表达、纯化RA的重组蛋白Mtan(RA-Mtan);测定RA-Mtan对底物S-腺苷同型半胱氨酸(S-adenosylhomocysteine,SAH)的催化活性,运用哈维弧菌报告菌株BB170检测催化底物的自诱导物2(Autoinducer-2,AI-2)活性。【结果】对RA的pfs序列分析结果表明,不同血清型RA的核苷酸一致性在93.9%-100%之间;SDS-PAGE检测结果表明,RA-Mtan呈可溶性表达;酶活测定表明RA-Mtan和禽致病性大肠杆菌(Avain pathogenic Escherichia coli,APEC)的Lux S蛋白共同作用于底物时,可产生浓度为176.7μmol/L的同型半胱氨酸(Homocysteine,HCY);AI-2活性检测结果表明,产生的AI-2具有生物学活性。【结论】RA不同血清型的pfs高度保守,RA pfs基因的编码产物RA-Mtan在体外具有催化SAH的活性,RA-Mtan和禽致病性大肠杆菌的Lux S蛋白共同作用于底物SAH时,能产生有活性的AI-2,为进一步研究pfs对RA的调控作用提供参考。

关 键 词:鸭疫里默氏杆菌,S-腺苷高半胱氨酸核苷酶,S-腺苷同型半胱氨酸,密度感应系统,自诱导物质AI-2

Catalytic activity of Mtan catalyzing S-adenosylhomocysteine in Riemerella anatipestifer
WU Xiao-K,XU D,JING Ya-Wei,LV Xiao-Long,HU Jian-Gang,MI Rong-Sheng,HUANG Yan,WANG Cheng-Ming,CHEN Zhao-Guo and HAN Xian-Gan.Catalytic activity of Mtan catalyzing S-adenosylhomocysteine in Riemerella anatipestifer[J].Microbiology,2017,44(5):1165-1170.
Authors:WU Xiao-K  XU D  JING Ya-Wei  LV Xiao-Long  HU Jian-Gang  MI Rong-Sheng  HUANG Yan  WANG Cheng-Ming  CHEN Zhao-Guo and HAN Xian-Gan
Institution:1. Shanghai Veterinary Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China,1. Shanghai Veterinary Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China;2. College of Veterinary Medicine, Yangzhou University, Yangzhou, Jiangsu 225009, China,1. Shanghai Veterinary Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China,1. Shanghai Veterinary Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China,1. Shanghai Veterinary Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China,1. Shanghai Veterinary Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China,1. Shanghai Veterinary Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China,1. Shanghai Veterinary Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China;2. College of Veterinary Medicine, Yangzhou University, Yangzhou, Jiangsu 225009, China,1. Shanghai Veterinary Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China and 1. Shanghai Veterinary Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China
Abstract:
Keywords:Riemerella anatipestifer  Pfs  S-adenosylhomocysteine  quorum sensing systm  AI-2
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