| 大白菜抗软腐病基因BrWRKY33植物表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 寇洪超,王翠花,孙玉文,徐文玲,牟晋华.大白菜抗软腐病基因BrWRKY33植物表达载体的构建[J].基因组学与应用生物学,2010,29(5). |
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| 作者姓名： | 寇洪超 王翠花 孙玉文 徐文玲 牟晋华 |
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| 作者单位： | 1. 安徽农业大学园艺学院,合肥,230036
2. 山东省农业科学院蔬菜研究所,济南,250100 |
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| 基金项目： | 国AC"863"项日"抗病虫转基因大白菜育种研究"、山东省农业良种工程项目和2010年山东省农业重大应用技术创新项目共同资助 |
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| 摘 要： | 利用农杆菌侵染法获得抗软腐病转BrWRKY33基因大白菜,首先要构建植物表达载体。本实验根据BrWRKY33基因的序列及pROK2表达载体的酶切位点设计引物(FN/RN),获得BrWRKY33基因,然后将该基因连接到克隆载体pGEM-TEasy,重新构建了克隆载体T-WRKY。经测序及酶切验证,选取PCR反应中错配率最低的产物,构建了表达载体pROK2-WRKY,并将该表达载体转入到根癌农杆菌EHA105中,并对其转化子进行了鉴定。结果表明,PCR扩增获得目的基因BrWRKY33全长约1443bp,PCR及酶切结果鉴定表明克隆载体T-WRKY已经重新构建成功。表达载体的PCR及BamHⅠ和KpnⅠ双酶切鉴定表明有4个重组子表现阳性,表明目的基因已经插入到pROK2表达载体,表达载体构建成功。PCR鉴定表明表达载体pROK2-WRKY已经转入根癌农杆菌EHA105中。本实验结果将为进一步研究大白菜抗软腐病基因的转化奠定基础。
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| 关 键 词： | 大白菜 软腐病 植物表达载体 |
Construction of a Plant Expressing Vector for BrW RKY33 Gene on Resistance against Chinese Cabbage Soft Rot |
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| Kou Hongchao,Wang Cuihua,Sun Yuwen,Xu Wenling,Mu Jinhua.Construction of a Plant Expressing Vector for BrW RKY33 Gene on Resistance against Chinese Cabbage Soft Rot[J].Genomics and Applied Biology,2010,29(5). |
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| Authors: | Kou Hongchao Wang Cuihua Sun Yuwen Xu Wenling Mu Jinhua |
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| Keywords: | BrWRKY33 |
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