干热法对人血浆血管性假血友病因子冻干品中病毒灭活效果的观察

目的探讨干热灭活法(dry heat treatment)对血管性假血友病因子(von willebrand factor,v WF)中猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)和脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EMCV)的灭活效果。方法以PPV或EMCV作为灭活指示病毒与v WF混合,并分别在(80±1)℃4、8、12、24、36、48、72 h,(90±1)℃4、12、24、36、48 h以及(99±1)℃5、15、30 min进行干热灭活处理。将在干热灭活前以及干热灭活后不同温度时间段的v WF样品接种ST细胞(swine testis)或Vero细胞培养,观察细胞病变(cytopathic effect,CPE),用Reed-Muench法计算残余PPV和EMCV的病毒滴度。对无CPE的样品进行盲传3代培养,验证其灭活效果,并检测干热处理前后的v WF活性。结果v WF中EMCV滴度在(80±1)℃、(90±1)℃以及(99±1)℃灭活条件下,均下降超过4.0 lg TCID_(50)/0.1 m L,v WF中PPV的滴度下降也均超过4.0 lg TCID_(50)/0.1m L。干热法灭活后v WF的活性下降20%,质量稳定。结论干热法可以灭活v WF中的PPV以及EMCV,且对样品的活性影响在允许范围之内。