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猫疱疹病毒I型环介导等温扩增检测方法的建立
引用本文:冀中豪,任文陟,郝杨,张铭锦,高巍. 猫疱疹病毒I型环介导等温扩增检测方法的建立[J]. 微生物学杂志, 2018, 0(4): 71-76
作者姓名:冀中豪  任文陟  郝杨  张铭锦  高巍
作者单位:吉林大学动物科学学院
基金项目:国家科技支撑计划项目 (2015BAI07B02) ;吉林省科技发展计划项目 (20170623093-09TC)
摘    要:建立一种环介导等温扩增(LAMP)检测方法,实现对猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)的快速、准确、简便检测。根据Gen Bank中FHV-1的TK基因设计引物,优化反应条件,通过琼脂糖凝胶电泳和SYBR GreenⅠ染色观察分析扩增效果。该方法特异性好,敏感性检测实验表明该检测方法最低能够检测到的模版是101copies/μL,是PCR检测方法灵敏度的10倍。金属浴、烘箱、恒温水浴锅与PCR仪四种不同的扩增反应仪器均可达到LAMP的要求,扩增出梯形条带。建立了针对FHV-1的LAMP检测方法,该种检测方法具有高特异性的扩增引物,对检测的仪器、反应条件及检测人员技术要求比较宽松,从扩增开始到通过SYBR GreenⅠ实现的结果可视化解读所用时间不到1 h,实现了快速、准确、简便检测FHV-1的目的。

关 键 词:环介导等温扩增;猫疱疹病毒Ⅰ型;SYBR GreenⅠ;胸腺嘧啶激酶基因

The Establishment of a Loop-Mediated Isothermal Amplification Detection Method for Feline Herpes Virus I
JI Zhong-hao,REN Wen-zhi,HAO Yang,ZHANG Ming-jin and GAO Wei. The Establishment of a Loop-Mediated Isothermal Amplification Detection Method for Feline Herpes Virus I[J]. Journal of Microbiology, 2018, 0(4): 71-76
Authors:JI Zhong-hao  REN Wen-zhi  HAO Yang  ZHANG Ming-jin  GAO Wei
Affiliation:Dept. of Lab. Animal Ctr., Coll. of Animal Sci., Jilin Uni., Changchun 130062,Dept. of Lab. Animal Ctr., Coll. of Animal Sci., Jilin Uni., Changchun 130062,Dept. of Lab. Animal Ctr., Coll. of Animal Sci., Jilin Uni., Changchun 130062,Dept. of Lab. Animal Ctr., Coll. of Animal Sci., Jilin Uni., Changchun 130062 and Dept. of Lab. Animal Ctr., Coll. of Animal Sci., Jilin Uni., Changchun 130062
Abstract:
Keywords:loop-mediated isothermal amplification   feline herpes virus I   SYBR Green I   thymidine kinase (TK) gene   detection method
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